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PI3K抑制剂(Quercetin)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:PI3K抑制剂(Quercetin)
英文名称:Quercetin
产品规格:1mL(10mM)|1g|5g
Quercetin是一种天然黄酮类化合物,能够刺激SIRT1,同时为PI3K的抑制剂,作用于PI3K γ,PI3K δ和PI3K β,IC50分别为2.4±0.6μM,3.0±0.0μM和5.4±0.3μM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:117-39-5
纯度:98.21%
分子量:302.24
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
2,8-双(三氟)-4-羟喹啉 99%Anti-GRM2+GRM4 促代谢型谷氨受体2+4抗体人角膜锁链蛋白(CDSN)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-溴磺酰 98%Anti-GRO Alpha/GRO-1 生长调节致癌因-1抗体人接触蛋白1(CNTN1)酶联免疫吸附测定试剂盒
二乙膦酰乙叔丁酯 95%Anti-MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬炎症蛋白2( GROβ)抗体人接触蛋白2(CNTN2)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-溴-4-氟 98%Anti-GRO gamma/CXCL3 生长调节致癌因gamma(GROγ)抗体人接触蛋白3(CNTN3)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-溴水杨 97%Anti-CXCL4/PF-4 血小板因子4抗体人接触蛋白4(CNTN4)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-溴-2-(三氟) 97%Anti-CXCL5 上皮中性粒活化肽78抗体人接触蛋白相关蛋白1(CNTNAP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-溴 98%Anti-GRP 促胃泌素释放肽抗体人接触蛋白相关蛋白样蛋白4(CNTNAP4)酶联免疫吸附测定试剂盒
5-吲哚 99%Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)人接头蛋白2(ELMO2)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-异烟 97%Anti-GRP94/gp96 葡萄糖调节蛋白94抗体人结蛋白(Des)酶联免疫吸附测定试剂盒
肉桂酰 97%Anti-GSK-3 alpha 葡萄糖合成激酶-3α抗体人结构特异性识别蛋白1(SSRP1)酶联免疫吸附测定试剂盒
3-肉桂 98%Anti-Phospho GSK3 alpha (Ser21) 化葡萄糖合成激酶3α抗体人结合珠蛋白(HP)酶联免疫吸附测定试剂盒
2-苄 99%Anti-Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 化葡萄糖合成酶1抗体人触珠蛋白相关蛋白(HPR)酶联免疫吸附测定试剂盒
2--5- 99%Anti-GSK-3 Beta (CT) GSK-3β抗体葡萄糖合成激酶-3β抗体人骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)酶联免疫吸附测定试剂盒
2--5- 97%Anti-GSK-3 Beta (CT) 葡萄糖合成激酶-3β抗体人转运蛋白2(TNPO2)酶联免疫吸附测定试剂盒
4-吲哚 98%Anti-phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 化葡萄糖合成激酶3β抗体人线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒
PI3K抑制剂(Quercetin)磷酸化DNA损伤关键蛋白Mre11抗体Human NDRG4 ELISA Kit化铵
蛋白激酶MST抗体Human NDUFA5 ELISA Kit胡薄荷酮
磷酸化蛋白激酶MST抗体Human NDUFA7 ELISA Kit3-氨基吡啶
磷酸化肌球蛋白轻链2抗体Human NDUFA8 ELISA Kit硫柳汞钠
髓鞘转录因子1抗体Human NDUFA9 ELISA Kit连翘酯苷B
髓样白血病-1抗体Human NDUFAF1 ELISA Kit蒽醌-2-磺酸钠
微管相关蛋白2抗体Human NDUFAF2 ELISA Kit鼠李糖
肌增强因子2B抗体Human NDUFAF4 ELISA Kit幼禽螺杆探针法荧光定量PCR试剂盒
热门标签:PI3K,抑制剂,Quercetin













