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NF-kB抑制剂
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:NF-kB抑制剂
英文名称:Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium
产品规格:1mL(10mM)|100mg
Pyrrolidinedithiocarbamate ammonium是选择性的NF-kB抑制剂。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:5108-96-3
别名:Ammonium pyrrolidinedithiocarbamate;APDC;1-Pyrrolidinedithiocarboxylic acid ammonium salt
纯度:98.0%
分子量:164.29
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
烯丁酯 CP,98%Anti-FABPB 脑型脂肪结合蛋白抗体人泛素蛋白D(UBD)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁邻二酚稳定剂Anti-factor V 凝血因子5抗体人泛素分解酶(DUB)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁邻二酚稳定剂Anti-factor VIII(FVIII) human 第八因子相关抗原抗体人泛素激活酶样蛋白(UBE1L)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙乙烯酯 CP,98%Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相关抗原抗体人泛素结合酶E2C(UBE2C)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硫化钼 AR,99%Anti-factor XIII 凝血因子13抗体人泛素连接酶E3A (UBE3A)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硫化钨 99.9%Anti-FADD Fas死亡结构域相关蛋白人非神经元性烯化酶(NNE)酶联免疫吸附测定试剂盒
生物冰袋,500g/袋,190*120*20mmAnti-phospho-FADD(Ser194) 化Fas死亡结构域相关蛋白抗体人多配体聚糖3(SDC3)酶联免疫吸附测定试剂盒
特丁硫 分析标准品(剧品)Anti-FAK 粘着斑激酶抗体人类胰蛋白酶(TPS)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硫化钼 AR,99%Anti-Phospho-FAK (Tyr397) 化粘着斑激酶抗体人衰老关键蛋白5(FBLN5)酶联免疫吸附测定试剂盒
化钼 99.6%Anti-Phospho-FAK (Tyr861) 化粘着斑激酶抗体人肺癌标志物DR⁻⁷0(DR⁻⁷0TM)酶联免疫吸附测定试剂盒
化钨 99.9%Anti-Phospho-FAK (Tyr576/577) 化粘着斑激酶抗体人胰腺再生蛋白1β(REG1β)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硫化钨 99.9%Anti-Phospho-FAK (Tyr925) 化粘着斑激酶抗体人肺表面活性物质相关蛋白A(SPA)酶联免疫吸附测定试剂盒
二硫化钨 99.99%,6µmAnti-Phospho-FAK (Tyr407) 化粘着斑激酶抗体人肺表面活性物质相关蛋白B(SPB)酶联免疫吸附测定试剂盒
碳化钨 9.8%,3-20nm Anti-phospho-FAK (Tyr577) 化粘着斑激酶抗体人肺表面活性物质相关蛋白C(SPC)酶联免疫吸附测定试剂盒
消螨通 分析标准品Anti-FAF1 Fas相关1因子抗体人肺表面活性物质相关蛋白D(SPD)酶联免疫吸附测定试剂盒
NF-kB抑制剂线粒体内膜蛋白抗体Human NUDT2 ELISA Kit花旗松素
基质金属蛋白酶-8/胶原酶2抗体Human NUDT16 ELISA Kit氨甲环酸
基质金属蛋白酶11抗体Human NUAK2 ELISA Kit抗g-氨基丁酸B2受体抗体流式组化
基质金属蛋白酶-12抗体Human NUAK2 ELISA KitL-甘-缬二肽
基质金属蛋白酶-15抗体Human NUDT19 ELISA Kit2-丁酮酸
基质金属蛋白酶-16抗体Human NUB1 ELISA Kit氯化锌
基质金属蛋白酶-17抗体Human NUDT21 ELISA Kit胆酸钠(猪)
膜突蛋白抗体Human NUBP2(Nucleotide-binding protein 2) ELISA Kit铝酸钠
热门标签:NF-kB,抑制剂













