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PlK4抑制剂(Centrinone)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:PlK4抑制剂(Centri)
英文名称:Centri
产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Centri是选择性的可逆的PlK4抑制剂,Ki值为0.16nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:1798871-30-3
纯度:98.01%
分子量:633.65
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
柠檬 97%, FCC, KosherAnti-CYP21 胆固21-羟化酶抗体人β葡糖苷酶(β-Glu)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶 98%Anti-CYP2C19 色素P450 2C19抗体人白介素1受体关联激酶3 (IRAK3)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶 97%Anti-CYP450 色素P450单氧化酶抗体人β葡萄糖酶(GUSβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶 Standard for GC, ≥99.0% (GC)Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱氨肝素结合蛋白61抗体人Syncollin蛋白(SYCN)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙香叶酯 96%Anti-CYP2E1 抗色素P450ⅡE1抗体人β-微管蛋白(TUBβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙香叶酯 90%,天然, FCC, Kosher Anti-Cytochrome C 色素 C抗体人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶酮 97%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr220) 化Disabled 1抗体人γ干扰素诱导单核因子(MIγ/CXCL9)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶酯 85%Anti-Phospho-Dab1 (Tyr232) 化Disabled 1抗体人γ谷氨酰半胱氨合成酶(γ-ECS)酶联免疫吸附测定试剂盒
香叶酯 85%,FCC, KosherAnti-Phospho-Dab1 (Ser491) 化Disabled 1抗体人X组脂酶A2(PLA2G10)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙叶酯 98%Anti-DACH2 转录调节因子DACH2抗体人γ谷氨酰转移酶1(γGT1)酶联免疫吸附测定试剂盒
乙叶酯 ≥98%, FCC, FGAnti-DARPP32 多巴、cAMP调节蛋白抗体人阿黑皮素原(POMC)酶联免疫吸附测定试剂盒
反式-2-己烯 97%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr34) 化多巴/cAMP调节神经蛋白抗体人食欲素A/阿立新A(OXA)酶联免疫吸附测定试剂盒
正己 98%Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 化多巴/cAMP调节蛋白抗体人肌-3-激酶催化亚β肽(PIK3Cβ)酶联免疫吸附测定试剂盒
正庚 97%Anti-DRD1 多巴受体D1抗体人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)酶联免疫吸附测定试剂盒
正庚 standard for GC, ≥98% (GC)Anti-DRD2 多巴受体D2抗体人肌-3-激酶催化亚σ肽(PIK3Cσ)酶联免疫吸附测定试剂盒
PlK4抑制剂(Centri)蛋白赖氨酸-6-氧化酶抗体Human ORC5L ELISA Kit地肤子皂苷 Ic
白酪氨酸激酶受体抗体Human ORC6 ELISA Kit苦木
同源盒转录因子LMX1A抗体Human OS9 ELISA KitL-色氨酸甲酯盐酸盐
转化生长因子β1结合蛋白1抗体Human OSBP ELISA Kit氧化型谷胱甘肽
狂躁基因同源蛋白MFNG抗体Human OSBPL10 ELISA KitL-酪氨酸乙酯
E3泛素蛋白连接酶MIB1抗体Human OSBPL11 ELISA KitL-酪氨酸叔丁酯
主导控制样蛋白1抗体Human OSBPL2 ELISA Kitα-酮基缬氨酸钙盐
主导控制样蛋白2抗体Human ORAI1 ELISA Kit磷酸二氢钠二水物
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