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二代酪氨酸激酶抑制剂(TKI抑制剂)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:二代酪氨酸激酶抑制剂(TKI抑制剂)
英文名称:Nilotinib
产品规格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|200mg|500mg
Nilotinib是一种二代酪氨酸激酶(TKI)抑制剂,作用于BCR-ABL比Imatinib有效,且有效作用于多种抗Imatinib的BCR-ABL突变型。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:641571-10-0
别名:Tasigna;AMN107
纯度:99.93%
分子量:529.52
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
烯二硫 95%双皮质素抗原
氟化钙 99.99% metals basis损伤DNA结合蛋白2抗原
方形塑料洗瓶框 500mm*500mm*100mm防御素β1抗原
对氨胂 98%防御素β1抗原(人)
盐左旋咪唑 99%防御素β2抗原(小鼠)
氮化硅 99.99%防御素β2抗原(大鼠)
铬片 厚度 ~1mm, 99.95% metals basis凋亡相关蛋白激酶1抗原
铬粒 99.95% metals basis,1-6mm鸭型肝炎A病抗原
肌苷 98%结蛋白抗原
四乙酰核糖 98%抑癌蛋白DKK1抗原
3-乙酰-2,5-二噻吩 99%DMBT1抑癌因抗原
2-乙酰-5-呋喃 98%DNA依赖蛋白激酶催化亚多肽抗原
杆菌肽锌 from Bacillus licheniformis, ~70,000 U/g多能发育相关因2抗原
2,5-二-3-(2H)呋喃酮 98%死亡受体4抗原
惕各乙酯 98%肿瘤调亡素/死亡受体5抗原
二代酪氨酸激酶抑制剂(TKI抑制剂)基尔曼氏细小病VP1/VP2抗体(大鼠潜在病KRV)C端Human PPP1R8 ELISA KitN-羟乙基乙二-N,N′,N′-三乙酸三钠
Kelch样蛋白20抗体Human PPP3CC ELISA Kit
激肽释放酶抑制剂抗体Human PPP3R2 ELISA Kit氯化镧
kelch样蛋白7抗体Human PPP2CA ELISA Kit羟基脲
TWIK相关酸敏感离子通道蛋白9抗体Human PPP2CB ELISA Kit镉
激肽释放酶6抗体Human PPP2R1B ELISA Kit总银杏酸(套)
激肽释放酶8抗体Human PPP2R2A ELISA Kit京尼平苷酸
血浆激肽释放酶抗体Human PPP3CC ELISA Kit芥子 (芥)
热门标签:二代酪氨酸激酶,抑制剂,TKI,抑制剂













