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Akt磷酸化激活剂(SC79)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:Akt磷酸化激活剂(SC79)
英文名称:SC79
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
SC79是一种能脑渗透的Akt磷酸化激活剂,增强Akt的活动。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:305834⁻⁷9-1
纯度:98.0%
分子量:364.78
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
化镨 99.99% metals basis分泌素(抗原)
化镨 99.9% metals basis分泌素受体(抗原)
氧化镨(III) 99.9% metals basis激酶信号-1抑制剂(抗原)
氟化镨(III) 无水,粉末,99.99% metals basis心肌肌凝蛋白多肽
硝铷 99.0% metals basis核突触蛋白(抗原)
硝铷 99.9% metals basis核突触蛋白(抗原)
化铷 SP癌相关抗原抗原
化铷 99.95% metals basisP物质受体(抗原)
化铷 AR,99.5%化钙介质素抗原
碳铷 99.8% metals basis神经激肽A受体(多肽抗原)
氟化铷 AR钙蛋白酶(多肽)
化铷 99.9%炎症负调控因子蛋白(抗原)
硫铷 99.99% metals basis微管相关蛋白(抗原)
硫铷 99.9% metals basis端粒酶(催化亚单位)(多肽抗原)
硫铷 99.0%转移生长因子–α(抗原)
Akt磷酸化激活剂(SC79)磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human PRPS1 ELISA Kit磷酸组
Notch配体Jagged 2蛋白抗体Human PRR13 ELISA KitL-苏氨醇
组蛋白去甲基化Jarid1C抗体Human C13orf33(Uncharacterized protein C13orf33) ELISA Kitα-甘油磷酸脱氢酶
组蛋白去甲基转移酶JMJD1B抗体Human PRUNE ELISA Kit刀豆素A
亲联蛋白2抗体Human PRPF8 ELISA Kit氯霉素
驱动蛋白家族蛋白13B抗体Human PRPH2 ELISA Kit2,4-二氯苯氧乙酸
驱动蛋白家族蛋白7抗体Human PRMT6 ELISA KitD-氨基葡萄糖盐酸盐
CREB结合蛋白抗体Human PRMT8 ELISA Kit阿拉伯树胶粉
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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