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DNA甲基化抑制剂
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:DNA甲基化抑制剂
英文名称:5-Azacytidine
产品规格:1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
5-Azacytidine是一种胞苷类似物,通过限制DNA甲基转移酶来抑制DNA甲基化。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:320-67-2
别名:Ladakamycin;5-AzaC;Azacitidine
纯度:98.24%
分子量:244.2
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
汞标准溶液10.00mg/L,溶剂:小鼠抗兔IgG腹水
间酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:小鼠抗大鼠IgG腹水
邻酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:小鼠抗牛IgG腹水
邻硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂:兔抗亲和素抗血清
间硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂:兔抗生物素抗血清
水质镍标样 浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品 兔抗牛IgM抗血清
对酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:兔抗鸡IgG抗血清
对酚标准溶液1009mg/L,溶剂:兔抗鸡IgM抗血清
中对标样 浓度范围:1004±5ug/mL,分析标准品兔抗狗IgG抗血清
镍标准溶液 500mg/L,溶剂:1%硝兔抗羊IgM抗血清
亚硝盐标准溶液 100mg/L,溶剂:水兔抗豚鼠IgG抗血清
亚硝盐标准溶液 1000μg/ml兔抗豚鼠IgM抗血清
水质标样 浓度范围:1.20-2.03(mg/L),分析标准品 兔抗人IgG抗血清
亚硝盐标准溶液 (以氮计)100mg/L,溶剂:水兔抗人IgM抗血清
硝根离子(NO4-)标准溶液500mg/L,溶剂:水兔抗猴IgG抗血清
DNA甲基化抑制剂肝生长因子激活物抑制剂抗体Human SERPINI2 ELISA Kit硫酸鱼精蛋白
HA tag标签单克隆抗体Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit氟康唑
血红素抗体Human SETD1B ELISA Kit莫能酸钠
戊型肝炎病抗体Human SERPINB8 ELISA Kit5-尿苷二磷酸
神经调节蛋白1抗体Human SERPINB9 ELISA Kit阿糖胸苷
神经胶质生长因子/神经调节蛋白β抗体Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit盐酸盐
组氨酸三聚体核苷结合蛋白1抗体Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit癸烷磺酸钠
组蛋白去乙酰化酶3抗体Human SERPINI2 ELISA Kit邻乙氧基苯甲酸
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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