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NEDD8活化酶抑制剂(MLN4924)
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详细内容
中文名称:NEDD8活化酶抑制剂(MLN4924)
英文名称:NEDD8-activating enzyme inhibitor
产品规格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
MLN4924是一种有效的选择性NEDD8活化酶(NEDD8-activating enzyme,NAE)抑制剂,IC50为4.7nM。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号:905579-51-3
别名:Pevonedistat
纯度:98.00%
分子量:443.52
储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. 避光保存及使用。
3. 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
闭口闪点标准物质 116.8℃锌指蛋白Zdhhc12抗体
开口闪点标准物质 165.8℃着丝粒ZW10相互作用蛋白1抗体
开口闪点标准物质 221.2℃锌指/环指蛋白1抗体
Ⅲ 分析标准品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析锌指/环指蛋白2抗体
山梨标准溶液 1.00mg/mL,体:纯水锌指蛋白3/环指蛋白3抗体
7B 95%锌指蛋白230抗体
二氧化硅标准溶液 100mg/L,体:0.05%Na2CO3锌指脂蛋白-1b抗体
钠标准溶液 1000µg/mL,体:1%HClzeta相关蛋白70抗体
钠标准溶液 100µg/mL,体:1%HCl白血病相关新因抗体
日落黄标准溶液0.500mg/ml,溶剂:水锌指蛋白307抗体
乙烯标准溶液0.88mg/ml,溶剂:斑联蛋白抗体
氟化钠 分析标准品,99.93%锌指蛋白474抗体
草钠 分析标准品,99.96%锌指蛋白BED4抗体
硫标准溶液 1000ug/ml,体:1%HCl着丝粒蛋白抗体
糖精钠标准溶液 1.00mg/mL,体:纯水锌指蛋白231抗体
NEDD8活化酶抑制剂(MLN4924)磷酸化组蛋白H3抗体Human SPRYD5 ELISA Kit异亮氨酸
短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体(小鼠,大鼠)Human MYOG(Myogenin) ELISA Kit斯皮诺素
同源盒蛋白HOXD10抗体Human SPTLC2 ELISA Kit白芍
HHIP样蛋白1抗体Human SPCS1 ELISA Kit姜黄
HOXA10抗体Human SPRED2 ELISA Kit一枝黄花
促黄体生成素受体抗体Human SPRR1B ELISA Kit三白草
HER2受体抗体(N端)Human SPZ1 ELISA Kit茜素双酯
HER2受体抗体Human SPRR2D ELISA Kit辛伐他汀
热门标签:NEDD8活化酶,抑制剂,MLN4924













