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线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
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详细内容
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中文名称:线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)
英文名称:Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC-1
产品规格:100T
发货周期:1~3天
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是一种以JC-1为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体,可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去化的比例。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。JC-1单体的大激发波长为515nm,大发射波长为529nm;JC-1聚合物的大激发波长为585nm,大发射波长为590nm。实际观察时,使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品,本试剂盒共可以检测200个样品。
储存条件:-20℃干燥避光保存,保质期1年
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
烟 99%人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)免疫试剂盒分子伴侣复合体TCP-1β抗体phospho-E2F1 (Ser337) 化转录因子E2F-1抗体
烟 分析标准品人骨桥素(OPN)免疫试剂盒分裂周期蛋白25C抗体phospho-E2F1 (Ser332) 化转录因子E2F-1抗体
烟酰 99%人骨膜蛋白/成骨特异性因子2(POSTN)免疫试剂盒过敏素C4/补体C4抗体phospho-DVL2(Thr224) 化蓬乱蛋白2抗体
烟酰 分析标准品,≥99.8%人骨胶原交联(Cr)免疫试剂盒脂肪结合蛋白3抗体Phospho-Doublecortin (Ser297) 化双皮质素抗体
烟酰 ≥99.5% (HPLC)人骨碱性酶(BALP)免疫试剂盒16号染色体开放阅读框48抗体phospho-DOK1(Tyr362) 化D酪氨激酶衰减蛋白1抗体
烟酰 用于和昆虫培养,≥99.5% (HPLC)人骨钙素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)免疫试剂盒色素P450 19抗体phospho-DOK1 (Tyr398) 化D酪氨激酶衰减蛋白1抗体
D-泛 98%人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫试剂盒CD28抗体phospho-Dnmt1(Tyr969) 化DNA转移酶1抗体
核黄素 98%人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框195抗体phospho-Dnmt1(Tyr399) 化DNA转移酶1抗体
醋维生素A USP/EP人骨成型蛋白7(BMP⁻⁷)免疫试剂盒NK抑制性受体2DL1抗体phospho-Dnmt1(Ser732) 化DNA转移酶1抗体
醋维生素A 培养人骨成型蛋白2(BMP-2)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框67抗体phospho-Dnmt1(Ser154) 化DNA转移酶1抗体
柠檬钠,二水 AR,99.0%人骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)免疫试剂盒κ-酪蛋白抗体phospho-DNA PK/PRKDC(Thr2609) 化DNA依赖性蛋白激酶抗体
DL-α-酚 96%人骨保护素(OPG)免疫试剂盒唾液结合性免疫球蛋白样凝集素7抗体phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2612) 化DNA依赖性蛋白激酶抗体
维生素B12 98%人谷胱甘肽硫转移酶pi因(GSTpi)免疫试剂盒Cappuccino蛋白抗体phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2056) 化DNA依赖性蛋白激酶抗体
维生素K1 98%人谷胱甘肽还原酶(GR)免疫试剂盒列腺素过氧化物合成酶3抗体phospho-DES (Thr76/Thr77) 化结蛋白抗体
维生素K1 分析标准品人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)免疫试剂盒补体因子H相关蛋白1抗体phospho-DES (Thr16) 化结蛋白抗体
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)L型钙通道蛋白抗体Human BCAS1 ELISA Kit副溶血性弧增液
电压依赖性钙通道Cav3.1抗体Human BTNL8 ( Butyrophilin-like protein 8) ELISA KitDL-胱氨酸
紧密连接蛋白3抗体Human BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA KitL-赖氨酸甲酯盐酸盐
磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human BCAT1/ECA39 ELISA KitD-2-氨基丁酸
磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human BCL2L10 ELISA KitBOC-L-异亮氨酸
1号染色体开放阅读框86抗体Human BCL6(B-cell lymphoma 6 protein) ELISA KitBOC-D-色氨酸
8号染色体开放阅读框59抗体Human BRD9 (Bromodomain-containing protein 9) ELISA KitFMOC-D-色氨酸
磷酸化补体成分5受体1抗体Human C14orf28 (Dopamine receptor-interacting protein 1) ELISA Kit弹性蛋白酶(猪胰)
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:线粒体膜电位检测,试剂盒,JC-1













