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Caspase-4活性测定试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
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详细内容
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中文名称：Caspase-4活性测定试剂盒
英文名称：Caspase-4 Activity colorimetric assay Kit
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-4活性。测定原理基于Caspase-4特异水解其多肽底物Ac-LEVD-pNA，释放出游离的硝基pNA，后者呈黄色在405nm具有大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-4的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-4可以和Apaf-1相互作用，并参与细胞色素c导致的Caspase-3激活，也可以和caspase-14相互作用。
所需仪器：酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长：大吸收波长405nm，如不具备也可在400～450nm范围内测定。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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R-1,1＇-联-2-萘酚 99%人质金属蛋白酶12(MMP-12)免疫试剂盒色素C P450 17A1抗体phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 化细丝蛋白A抗体
(S)-(-)-2,2＇-双(二膦)-1,1＇-联萘 98%人质金属蛋白酶10(MMP-10)免疫试剂盒膜蛋白CLDND1抗体Phospho-FHIT (Tyr114) 化脆性组氨三联体抗体
1,3-双(二膦)烷 97%人质金属蛋白酶1(MMP-1)免疫试剂盒二氢嘧啶酶相关蛋白1抗体Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 化碱性成纤维生长因子受体1抗体
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1,2-双(二膦)乙烷化镍 98%人肌质/内质网钙ATP酶(ATP2A1)免疫试剂盒钙蛋白酶抑制蛋白抗体Phospho-FGFR1 (Tyr307) 化碱性成纤维生长因子受体1抗体
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2-二环己膦-2＇-(N,N-二)-联 98%人肌养蛋白(dystrophin)免疫试剂盒胞浆钙独立脂酶A2抗体phospho-FAS (Tyr291) 化载脂蛋白A1抗体
二叔丁化膦 96%人肌生成素(MYOG)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框98抗体phospho-FAS (Tyr232) 化载脂蛋白A1抗体
2-二膦 97%人肌激酶同工酶MM(CK-MM)免疫试剂盒COX4NB蛋白抗体phospho-FANCG (Ser383) 化DNA损伤修复因XRCC9抗体
2-(二膦) 97%人肌激酶同工酶MB(CK-MB)免疫试剂盒肿瘤/抗原77抗体phospho-FANCD2(Ser222) 化FANCD2抗体
2-(二膦)乙 95%人肌激酶同工酶BB(CK-BB)免疫试剂盒CD81抗体Phospho-FAK/PTK2(Tyr397) 化粘着斑激酶抗体
2-(二-叔丁膦)-2＇-(N,N-二氨)联 98%人肌肉骨骼受体酪氨激酶抗体(MUSK Ab)免疫试剂盒辅酶Q10B抗体Phospho-FAK(Tyr925) 化粘着斑激酶抗体
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2号染色体开放阅读框71抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit缓冲李氏增肉汤基础添加剂每支加入225ml缓冲李氏增肉汤基础中
质膜微囊蛋白-1抗体Human CEP44 ELISA KitD-脯氨酸甲酯盐酸盐
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
热门标签：Caspase-4活性测定,试剂盒
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