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细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)
英文名称:
产品规格:100次/500次/3000次/10000次
发货周期:1~3天
产品原理: Cell Counting Kit(细胞增殖与毒性检测试剂盒)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒,其性能优于目市面上进口的CCK-8试剂盒。
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
产品优势: 可用于细胞因子诱导的细胞增殖检测、抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测、一些药物诱导的细胞生长抑制检测;操作方法非常便捷、快速。
保存条件:4°保存一年,-20°两年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
N,N-二酰 AR,99.5%人巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框72抗体phospho-HSF1(Ser307) 化热休克因子1抗体
N,N-二酰 GR,99.9%人巨噬集落激因子受体(M-CSFR)免疫试剂盒7号染色体开放阅读框30抗体phospho-HSF1(Ser303) 化热休克因子1抗体
N,N-二酰 for HPLC, ≥99.9%人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫试剂盒7号染色体开放阅读框57抗体phospho-HRH1(Ser398) 化组受体H1抗体
N,N-二酰 农残, ≥99.9%人巨噬激蛋白(MSP)免疫试剂盒7号染色体开放阅读框36抗体Phospho-HP1(Tyr43) 异染色质蛋白1化抗体(果蝇)
N,N-二酰 ACS光谱, ≥99.8%人巨泌素免疫试剂盒7号染色体开放阅读框42抗体Phospho-HP1 gamma (Ser93) 化染色质相关蛋白1-γ抗体
N,N-二酰 生物技术,≥99.9%人盐抵抗的性酶(TRAP)免疫试剂盒7号染色体开放阅读框43抗体phospho-HP1 alpha (Tyr24) 化异染色质蛋白1抗体(果蝇)
N,N-二酰 for GC-HS, ≥99.9% (GC)人相关抗原9(SPAG9)抗体免疫试剂盒7号染色体开放阅读框44抗体phospho-HOMER3(Thr36) 化HOMER3蛋白抗体
N,N-二酰 分子生物学,≥99.9%人相关抗原7(SPAG7)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框40抗体phospho-HNF4 (Ser313) 化肝核因子4α抗体
乙酰乙乙酯 >99.0%(GC)人精脒/精N(1)-乙酰转移酶样蛋白1(SATL1)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框37抗体phospho-HNF4 (Ser304) 化肝核因子4α抗体
正己烷 for HPLC, ≥98.0% (GC) 人精合成酶(SRM)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框45抗体phospho-HMGN1(Ser20+Ser24) 化高迁移率核小体结合蛋白1
1,6-己二 standard for GC人精氨酰-tRNA合成酶(RARS)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框80抗体phospho-HMGCR(Ser872) 化三羟辅酶A还原酶抗体
1,6-己二 98%人精氨脱羧酶(ADC)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框3抗体Phospho-Histone H3(Thr3) 化组蛋白H3抗体
对二酚 AR人精氨酶2(ARG2)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框47抗体Phospho-Histone H3(Ser28) 化组蛋白H3抗体
正己烷 Standard for GC,>99.5%(GC)人精氨(Arg)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框48抗体Phospho-Histone H3 (Thr3) 化组蛋白H3抗体
正己烷 AR,97%人紧密连接蛋白1(ZO1)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框58抗体Phospho-Histone H3 (Thr11) 化组蛋白H3抗体
细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)趋化素样因子超家族成员2抗体Human DDX3(DEAD box protein 3, X-chromosomal) ELISA Kit人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒,GP-BB ELISA
胱硫γ裂解酶抗体Human ECM2 ELISA Kit人血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒,
囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA Kit人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒,
酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体Human E2F4 ELISA Kit人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒,
CD40L抗体Human E2F7 ELISA Kit人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒,
α-s1酪蛋白抗体Human EDAR ELISA Kit小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒,
CIDEB抗体Human EDC3 ELISA Kit大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒,
高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体Human EDC4 ELISA Kit大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒,
热门标签:细胞增殖与毒性检测,试剂盒,CCK-8













