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PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒
英文名称：
产品规格：500T
发货周期：1～3天
PKH67/PI 双染细胞毒性检测试剂盒是利用细胞荧光染料PKH67和PI对细胞进行染色，利用PKH67标记靶细胞，PI标记死的靶细胞来区分不同的细胞，活的靶细胞成绿色，死的靶细胞成红色和绿色，从而检测细胞毒性作用。
根据不同的实验方案设计，可以用来检测化合物的细胞毒性作用。也可以用来检测杀伤性T 细胞或NK 细胞介导的细胞毒作用。
荧光染料PKH67是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。对细胞毒性较小，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。
在细胞分裂增殖过程中，PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次(1/2的荧光强度)，二次(1/4的荧光强度)，三次(1/8的荧光强度)，以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测，PKH67 还可以用于细胞的体外盒体内示踪，标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。PKH67 毒性较小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。
PKH67/PI标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞毒性检测。
PKH67标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=490 nm,λem=502 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为502nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。PI标记细胞呈红色荧光，流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为647nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL2 detection channel。
PKH67标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞毒性外，还可单染后用于细胞增殖检测，或者用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
储存条件：-20℃避光保存。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
碳烯酯 99%人柯萨奇病A16(CVA16)抗体(IgG)免疫试剂盒化CD19抗体phospho-NFATc2(Ser330) 化核因子活化T胞浆蛋白2抗体
碳烯酯 CP人柯萨奇病A16(CVA16)免疫试剂盒淋巴趋化因子CCL21抗体phospho-NFATc2(Ser326) 化核因子活化T胞浆蛋白2抗体
碳烯酯 for HPLC, 99.7%人柯萨奇病(Cox V)抗体(IgM)免疫试剂盒表面趋化因子受体2A抗体phospho-NFAT5 (Ser1197) 化活化T核因子5蛋白抗体
碳烯酯 99.7%,无水人柯萨奇病(Cox V)抗体(IgG)免疫试剂盒表面趋化因子受体2B抗体Phospho-NF2(Ser518) 化2型神经纤维瘤抗体
对氧 97.0%人抗组织转谷氨酰酶(tTG)抗体(IgG)免疫试剂盒表面趋化因子受体2抗体phospho-NF1(Ser2817) 化1型神经纤维瘤抗体
对氧 AR，99.0% 人抗组织转谷氨酰酶(tTG)抗体(IgA)免疫试剂盒金属肽链内切酶抗体phospho-NF1(Ser2515) 化1型神经纤维瘤抗体
对 98%人抗组蛋白抗体(AHA)免疫试剂盒钙介质素抗体phospho-NEK9(Thr210) 化丝氨/苏氨蛋白激酶NEK9抗体
对氨酚 CP，98%人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体免疫试剂盒表面趋化因子受体6抗体Phospho-NEDD4L (Ser342) 化泛素连接酶NEDD4-2抗体
对氨酚 99% (HPLC)人抗组氨酰tRNA合成酶,质(HARS)抗体免疫试剂盒胸腺活化调节趋化因子抗体Phospho-NDRG1 (Thr346) 化分化相关因NDRG1抗体
间 CP,98%人抗内膜抗体(EMAb)免疫试剂盒半胱蛋白酶蛋白-6抗体(N端)Phospho-NDRG1 (Ser330) 化分化相关因NDRG1抗体
间 GR，99%人抗滋养膜抗体(ATA)免疫试剂盒CSMD1抗体phospho-NDEL1(Thr219) 化中心粒蛋白Nudel抗体
邻 GR,99%人抗着丝点抗体(ACA)免疫试剂盒烟碱型乙酰胆碱受体α4抗体phospho-NDEL1(Ser242) 化中心粒蛋白Nudel抗体
邻 GCS，>99.5% (GC) 人抗转谷氨酰酶抗体(IgG)免疫试剂盒表面趋化因子受体9抗体phospho-NDEL1(Ser231) 化中心粒蛋白Nudel抗体
邻 CP,98%人抗转谷氨酰酶抗体(IgA)免疫试剂盒表面趋化因子受体5抗体phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943) 化钠ATP酶α1多肽抗体
对硝 CP,98%人抗中性粒核周抗体(pANCA)免疫试剂盒胱抑素C/半胱氨蛋白酶抑制剂C抗体Phospho-Myt1(Ser83) 化髓鞘转录因子1抗体
PKH67/PI双染细胞毒性检测试剂盒间隙连接蛋白29抗体Human EPSTI1 ELISA Kit糖原Ⅱ
间隙连接蛋白29抗体Human ERAL1 ELISA Kit玫瑰红三羧酸铵
表面趋化因子受体7抗体Human EPAC1(Exchange protein directly activated by cAMP 1) ELISA Kit人Ⅲ型胶原肽（PⅢNP）ELISA试剂盒,PⅢNP ELISA kit
神经母瘤源性分泌蛋白抗体Human ERAP2(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 2) ELISA Kit人瘦素（LEP）ELISA试剂盒,LEP ELISA
染色质修饰蛋白2B抗体Human ENDOG(Endonuclease G) ELISA Kit人FMS样酪氨酸激酶3配体（Flt-3L）ELISA试剂盒,
骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B抗体Human EPAC2 ELISA Kit人混合系列蛋白激酶样结构域（MLKL）ELISA试剂盒,
神经蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN5抗体Human ENO3 ELISA Kit人凝血因子Ⅱ（FⅡ）ELISA试剂盒,
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热门标签：PKH67/PI双染细胞毒性检测,试剂盒
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