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中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
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详细内容
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中文名称:中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称:
产品规格:250T|500T
发货周期:1~3天
细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(中性红法)是利用细胞对中性红的摄入能力来检测细胞增殖或细胞毒性。中性红可以被活细胞所摄入,并在溶酶体中积累。在细胞增殖加快时,细胞数量增多,可以摄入的中性红的量就会增加。在细胞受到损伤时,中性红的摄入能力会下降。这样通过对于中性红摄入量的不同就可以确定细胞的增殖或毒性情况。
储存条件:-20℃保存。
有效期:一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
邻二酰亚 99%人类泛素蛋白ISG15 免疫试剂盒整合素αM/巨噬表面分子抗体phospho-P53(Ser392) 化肿瘤抑制因P53抗体
2-乙-3-吡 99%人类白抗原G(HLA-G)免疫试剂盒血小板内皮黏附分子-1抗体phospho-P53(Ser376) 化肿瘤抑制因P53抗体
2-乙-3-吡 ≥98%, FCC, Kosher, FG人类白抗原E(HLA-E)免疫试剂盒血小板内皮黏附分子1抗体phospho-P53(Ser37) 化肿瘤抑制因P53抗体
18-冠-6 99%人类白抗原B27(HLA-B27)免疫试剂盒CD34抗体phospho-P53(Ser33) 化肿瘤抑制因P53抗体
二, 含稳定剂铜屑, 98%人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)免疫试剂盒CD36抗体phospho-P53(Ser315) 化肿瘤抑制因P53抗体
代异戊烷 97%人酪氨酰tRNA合成酶(YARS)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白6抗体phospho-P53(Ser20) 化肿瘤抑制因P53抗体
乙烷 99%,含铜屑稳定剂人酪氨酰DNA 二酯酶1(TDP1)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白17抗体phospho-P53(Ser15) 化肿瘤抑制因P53抗体
1-戊烷 98%,含稳定剂铜屑人酪氨羟化酶(TH)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白4抗体Phospho-p40phox (Thr154) 化嗜中性粒胞浆因子4抗体
三 AR,99.5%人酪氨激酶2(Tyk-2)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框34抗体phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182) 化丝裂原活化蛋白激酶p38抗体
代正丁烷 98%人酪氨蛋白激酶受体TYRO3(TYRO3)免疫试剂盒酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗体phospho-p23 (Ser113) 化端粒酶结合蛋白P23抗体
1-烷 99%人兰尼碱受体2(RYR2)免疫试剂盒凋亡加强结构域蛋白9抗体phospho-p107/RBL1(Ser975) 化视网膜母瘤样蛋白p107抗体
CP,95.0%(剧品)人兰尼碱抗体免疫试剂盒胆固氧化酶抗体phospho-p107(Thr369) 化视网膜母瘤样蛋白p107抗体
AR,98.0%(剧品)人赖氨酰氧化酶免疫试剂盒半胱蛋白酶蛋白14抗体phospho-ODF2(Ser796) 化尾部结构蛋白抗体
三溴化 CP,98.0% 人赖氨特异性脱酶5A(JARID1A)免疫试剂盒半胱蛋白酶蛋白5抗体Phospho-Nur77(Ser351) 化孤儿核受体蛋白Nur77抗体
四 97%人醌NADH脱氢酶1(NQO1)免疫试剂盒猪瘟病抗体Phospho-Numb (Ser276) 化膜相关蛋白Numb抗体
中性红细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒间粘附分子1抗体Human ERp19 ELISA Kit兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒,
CD105抗体Human ESAM(Endothelial cell-selective adhesion molecule) ELISA Kit蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(vtg)ELISA试剂盒,
轴突蛋白5抗体Human ESCO2 ELISA Kit角蛋白13(CK-13)ELISA试剂盒--动物,人
转录因子COUP1抗体Human ESD ELISA Kit血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒--动物,人
表皮生长因子样蛋白1抗体Human ESF1 ELISA Kit赖氨酸铁琼脂(LIA)
癌胚抗原相关粘附分子1抗体Human ESPN ELISA KitL-半胱氨酸乙酯盐酸盐
19号染色体开放阅读框75抗体Human ERGIC3 ELISA KitBOC-D-谷氨酸
隐花色素蛋白1抗体Human ERH ELISA KitFMOC-L-丙氨酸
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:中性红细胞增殖及细胞毒性检测,试剂盒













