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Caspase 6抑制剂
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:Caspase 6抑制剂
英文名称:
产品规格:200μl
发货周期:1~3天
Z-VEID-FMK是一种高效可逆的caspase-6的小分子抑制剂。可以抑制由Caspase 6激活导致的细胞凋亡。Z-VEID-FMK分子式为C31H45FN4O10,分子量为652.7。
Z-VEID-FMK采用进口高品质原料分装配制,浓度为5mM。本产品适用于需要用到Z-VEID-FMK的各种实验,请根据不同的实验需要进行配制和使用,具体请参考相关文献或实验指南。
储存条件:-20℃保存。
有效期:一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
1,1'-联萘酚-2,2'-双(三氟磺酯) 98%人离子胞内通道蛋白4(CLIC4)免疫试剂盒中心体和纺锤体相关蛋白1抗体phospho-PKC delta (Ser645) 化蛋白激酶C亚性D型抗体
二膦 95%人绿脓杆菌外素A(PEA)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框153抗体phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体
(R)-(-)-5,5'-双[二(3,5-二叔丁-4-氧)]-4,4'-二-1,3人硫脂抗体免疫试剂盒4号染色体开放阅读框19抗体Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 化蛋白激酶C α/β2抗体
(S)-DTBM-SEGPHOS 98%人硫氧还蛋白域包含蛋白6(TXNDC6)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框27抗体phospho-PKA R2 (Ser96) 化蛋白激酶A受体2α亚抗体
1H-咪唑-4- 98%人硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶,线粒体(PRDX3)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框22抗体phospho-PKA beta(Ser338) 化蛋白激酶Aβ抗体
三氟磺酐 98%人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框14抗体Phospho-Pin1 (Ser16) 化肽脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体
3-溴 98%人硫氧还蛋白,线粒体(TXN2)免疫试剂盒X染色体开放阅读框21抗体Phospho-PIM1(Tyr218) 化病整合位点蛋白1抗体
并-15-冠-5 98%人硫氧化还原蛋白(Trx)免疫试剂盒化C端结合蛋白1抗体phospho-PIK3R2(Tyr467) 化脂酰肌激酶p85β抗体
邻二酚-O,O′-二乙 97%人硫乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)免疫试剂盒钙粘附蛋白8抗体phospho-PIK3R1(Tyr556) 化脂酰肌激酶抗体
1-(3-氨)吡咯烷 97%人硫褪黑色素(MS)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框192抗体phospho-PIK3R1(Tyr467) 化脂酰肌激酶抗体
2-氧溴乙烷 98%人硫软骨素蛋白聚糖5(CSPG5)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框87抗体phospho-PIK3C3(Ser676) 化脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体
代异丁烷 98%人硫软骨素N-乙酰氨半糖转移酶1(CSGALNACT1)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框91抗体phospho-PIK3C3(Ser282) 化脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体
代正烷 99%人硫软骨素(CS)免疫试剂盒22号染色体开放阅读框25抗体phospho-PIK3C3(Ser164) 化脂酰肌激酶3催化亚单位3抗体
代正烷 分析标准品,≥99.8% (GC)人硫皮肤素-硫软骨素PG(DSCSPG)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框196抗体phospho-PI3KCA(Tyr317) 化脂酰肌激酶催化亚单位A抗体
代仲丁烷 99%人硫皮肤素(DS)免疫试剂盒5号染色体开放阅读框35抗体phospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524) 化脂酰肌激酶催化亚单位D抗体
Caspase 6抑制剂10号染色体开放阅读框93抗体Human FAM92A1 ELISA Kit人促黄体(LH)ELISA试剂盒,LH ELISA
10号染色体开放阅读框63抗体Human FAM3D ELISA Kit人骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒,CTX-2 ELISA
10号染色体开放阅读框132抗体Human FAM8A1 ELISA Kit人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒, OPG ELISA
10号染色体开放阅读框30抗体Human FAM40B ELISA Kit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒,PARP ELISA
10号染色体开放阅读框140抗体Human FAM160B1 ELISA Kit人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框125抗体Human FAM160B2 ELISA Kit人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框129抗体Human FAM114A1 ELISA Kit人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框159抗体Human FAM116B ELISA Kit人表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒,
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