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吖啶橙染色试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：吖啶橙染色试剂盒
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
橙(Acridine Orange，AO)为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA 结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染，因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
储存条件：-20℃避光保存。
有效期：一年。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
高钠，无水 99.99% metals basis人胶原C内肽酶增强子1(PCOLCE1)免疫试剂盒富含半胱氨C端蛋白1抗体Phospho-SGK1 (Ser422) 化糖皮质激素调节激酶1抗体
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高钠，一水 ACS, 98%人动力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)免疫试剂盒壁合成蛋白43抗体Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261) 化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体
钠 CP, ≥98.0%人病整合位点1(Pim1)免疫试剂盒19号染色体开放阅读框29抗体Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) 化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体
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过硫氢 ≥47% KHSO5 basis人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)免疫试剂盒化周期检测点激酶2抗体phospho-SCNN1B(Ser633) 化上皮钠通道β2抗体
二氨酰 97%人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)免疫试剂盒化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Phospho-SATB1 (Ser47) 化核质结合区结合蛋白1抗体
3-硝-4-氨酚 98%人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)免疫试剂盒化周期素依赖性激酶2抗体Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 化S6核糖体蛋白抗体
4-硝邻二 97%人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)免疫试剂盒化周期检测点激酶1抗体Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 化S6核糖体蛋白抗体
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纳米四氧化三铁 99.5%,20nm 球形人葡萄糖6异构酶(GPI)免疫试剂盒化α-连环蛋白抗体phospho-RUNX2(Ser451) 化成骨特异性转录因子抗体
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热门标签：吖啶橙染色,试剂盒
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