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Hoechst33342染色试剂盒
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详细内容
中文名称:Hoechst33342染色试剂盒
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
Hoechst33342染色试剂盒可用于细胞凋亡检测,也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色,染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。Hoechst33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 能少许进入正常细胞膜,使其染上低蓝色,而凋亡细胞的膜通透性增强,因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33342 比正常细胞的多,荧光强度要比正常细胞中要高,此外,凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst 33342 排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。Hoechst 33342的大激发波长为346nm,大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA 结合后,大激发波长为350nm,大发射波长为461nm。
本Hoechst 33342染色试剂盒可直接用于活细胞或组织的细胞核染色,也可用于固定细胞或组织的细胞核染色。
储存条件:HO33342液-20℃避光保存。B液2-8℃保存。
有效期:一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
环己 >99.0%(GC)人鞘氨激酶1(SPK1)免疫试剂盒化原癌因c-kit抗体phospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169) 化锌指转录因子Slug抗体
环己 ≥99.5% (GC)人鞘氨(SPH)免疫试剂盒化原癌因c-kit抗体Phospho-SMC1(Ser957) 化染色体结构维持蛋白质1抗体
甜蜜素 99%人桥粒芯糖蛋白3抗体(IgG)免疫试剂盒胸腺质淋巴生成素受体抗体Phospho-SMC1 (Ser360) 化染色体结构维持蛋白质1抗体
乙 95%人桥粒芯糖蛋白2(DSG2)免疫试剂盒化非受体酪氨激酶c-Abl抗体Phospho-Smad3(Ser425) 化信号转导分子SMAD3抗体
乙 50%溶液人桥粒芯糖蛋白1抗体(IgG)免疫试剂盒化非受体酪氨激酶c-Abl抗体Phospho-Smad3(Ser423/425) 化信号转导分子SMAD3抗体
溴乙 97%人桥粒糖蛋白2(DSC2)免疫试剂盒蛋白激酶PKC/CPI-17抗体phospho-Smad3(Ser213) 化信号转导分子SMAD3抗体
二氟 98%人羟赖氨糖苷(HOLG)免疫试剂盒化非受体酪氨激酶c-Abl抗体Phospho-Smad3(Ser208) 化信号转导分子SMAD3抗体
乙 98%人羟赖氨(Hyl)免疫试剂盒化非受体酪氨激酶c-Abl抗体phospho-Smad3(Ser204) 化信号转导分子SMAD3抗体
二 98%人羟戊二单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)免疫试剂盒胰辅脂酶抗体Phospho-Smad2(Thr220) 化信号转导分子SMAD2抗体
二乙 98%人羟戊二单酰辅酶A(HMG-CoA)免疫试剂盒19号染色体开放阅读框45抗体Phospho-Smad2(Ser465/467) 化信号转导分子SMAD2抗体
二乙酯 97%人羟赖正己氨(HLNL)免疫试剂盒过氧化氢诱导转录蛋白1抗体phospho-Smad2(Ser465) 化Smad2抗体
二氟乙酯 98%人羟脯氨(Hyp)免疫试剂盒核因子NFκB激活蛋白1抗体Phospho-Smad2(Ser245/250/255) 化信号转导分子SMAD2抗体
二溴乙酯 97%人强啡肽(Dyn)免疫试剂盒第12号染色体开放阅读框23抗体Phospho-Smad1/5(Ser463/465) 化信号转导分子Smad-1/5抗体
溴乙酯 97%人潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)免疫试剂盒γ-连环素/连接蛋白γ抗体Phospho-Smad1(Ser206) 化信号转导分子Smad-1抗体
三乙酯 99%人潜伏膜蛋白1(LMP-1)免疫试剂盒10号染色体开放阅读框4抗体phospho-SLK/FYN (Tyr530) 化酪氨蛋白激酶Fyn/同步原癌因抗体
Hoechst33342染色试剂盒色素b5还原酶3抗体Human FHL1 ELISA Kit小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒,
CWC22蛋白抗体Human FGFR1OP2 ELISA Kit小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒,
9号染色体开放阅读框95抗体Human FHL3 ELISA Kit小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框67抗体Human FEV ELISA Kit小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒,
磷酸化酪蛋白激酶1γ1+γ2+γ3抗体Human FGF13 ELISA Kit小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒,
原卟啉氧化酶3抗体Human FHL2 ELISA Kit小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒,
间隙连接蛋白43抗体Human FGF18 ELISA Kit小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒,
紧密连接蛋白25抗体Human FBXO3 ELISA Kit大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA试剂盒,
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