当前位置: 阿仪网 > 上海谷研实业有限公司 > 产品展示 > 细胞生物学试剂 > 细胞凋亡与增殖 > AO/EB双染试剂盒
AO/EB双染试剂盒
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:10年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:6822274
详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:AO/EB双染试剂盒
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
AO/EB双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。橙(AO)具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm,吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA 结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光,红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此,在荧光显微镜下观察,橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染,因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
储存条件:A液和B液-20℃避光保存。C液2-8℃保存。
有效期:一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
马来二酯 98%人缺血修饰白蛋白(IMA)免疫试剂盒紧密连接蛋白8抗体phospho-SYN1(Ser549) 化神经突触素1抗体
乙酯 AR,99% 人犬尿氨(KYN)免疫试剂盒化半胱氨蛋白酶9抗体Phospho-Syk (Tyr525/526) 化非受体型酪氨蛋白激酶抗体
乙 CP人脱氢酶7家族,成员A1(ALDH7A1)免疫试剂盒化分裂周期蛋白25B抗体Phospho-Syk (Tyr323) 化非受体型酪氨蛋白激酶抗体
乙 GR,99%人糖还原酶(AR)免疫试剂盒化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体phospho-STXBP1(Ser515) 化神经突触膜胞内蛋白抗体
氧乙酯 99%人缩酶(ALD)免疫试剂盒化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体Phospho-Stathmin(Ser38) 化原癌因蛋白18抗体
1-萘 98%人固酮(ALD)免疫试剂盒化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体Phospho-Stathmin(Ser25) 化原癌因蛋白18
2-氧萘 98%人去乙酰化酶Sirtuin⁻⁷(SIRT7/SIR2L7)免疫试剂盒化p21蛋白抗体phospho-Stathmin 1 (Ser63) 化原癌因蛋白18抗体
棕榈棕榈酯 95%人去乙酰化酶Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫试剂盒化p21蛋白抗体phospho-Stathmin 1 (Ser24) 化原癌因蛋白18抗体
2-并噁唑啉酮 98%人去乙酰化酶Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框84抗体Phospho-Stathmin (Ser16) 化原癌因蛋白18抗体
N-吡咯烷酮 AR,99.0%人去乙酰化酶Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫试剂盒化p21蛋白抗体phospho-STAT6(Tyr641) 化信号转导和转录激活因子6抗体
科里内酯 98%人去乙酰化酶Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫试剂盒化转录调节因子CEBP α 抗体phospho-STAT6(Thr645) 化信号转导和转录激活因子6抗体
Selectfluor® 氟试剂 95%人去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫试剂盒CLEC2D蛋白抗体phospho-STAT5b(Ser731) 化信号转导和转录激活因子5b抗体
(三氟)硅烷 96%人去乙酰化饥饿激素(dGHRL)免疫试剂盒富含半胱氨与表皮生长因子样蛋白2抗体phospho-STAT5a(Tyr694) 化信号转导和转录激活因子5a抗体
3'-氨乙酮 97%人去唾液糖蛋白受体(ASGPR)抗体免疫试剂盒醌氧化还原酶样蛋白1抗体phospho-STAT5a(Tyr694) 化信号转导和转录激活因子5a抗体
2-氨二酮 98%人去唾液糖蛋白受体(ASGPR)免疫试剂盒铜代谢结构域蛋白9抗体phospho-STAT5a(Ser780) 化信号转导和转录激活因子5a抗体
AO/EB双染试剂盒2号染色体开放阅读框50抗体Human FGF16 ELISA Kitβ内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒--动物,人
科凯恩氏综合症相关蛋白/早衰蛋白CSA抗体Human FGF17 ELISA Kit察氏琼脂
磷酸化角蛋白8抗体Human FMN2 ELISA KitN-乙酰-L-肉碱盐酸盐
磷酸化角蛋白8抗体Human FGF18 ELISA Kit二氢醉椒素 Dihydrokavain
磷酸化角蛋白18抗体Human FDX1 ELISA Kit槲皮素 Quercetin
胞粘蛋白2抗体Human FDXACB1 ELISA Kit对基-β-D-吡喃葡糖醛酸苷
色素CPA6抗体Human FEM1B ELISA Kit油酸甘油酯
色素CYP3A抗体Human FDPS ELISA Kit人普通急性白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒, CALLA ELISA kit
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:AO/EB双染,试剂盒













