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支原体检测试剂盒
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详细内容
中文名称:支原体检测试剂盒
英文名称:Mycoplasma Detection Kit
产品规格:100T-200T
发货周期:1~3天
本试剂盒是利用荧光染料检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。Hoechst 33258的大激发波长为346nm,大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,大激发波长为352nm,大发射波长为461nm。
操作步骤:
贴壁细胞:
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2×104。同时,接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。
2.5天后,先吸去培养液,再加入1ml的固定液,静置20min,
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15-20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入一滴封片液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
悬浮细胞:
1.收集需检测的细胞,1500rpm,5min。
2.将收集的细胞涂片于载玻片上,再加1ml的固定液,静置20min。
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15~20min或室温静置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,用无菌水洗涤玻片3次,直接风干。风干后加入一滴封固液,并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| 支原体检测试剂盒 | Mycoplasma Detection Kit | 100T-200T |
公司产品仅用于科研细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
烧碱石棉 CP, 10-20目人丝氨蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G(Serpina3g)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框122抗体PJA2/RNF131 环指蛋白131抗体
邻联 AR,98%人丝氨蛋白酶HTRA1(HTRA1)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框123抗体PIWIL4 piwi样4蛋白抗体
邻联 CP,97%人丝氨/苏氨激酶24(STK24)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框124抗体PIWIL3 piwi样3蛋白抗体
邻联 分析标准品,用于环境分析,≥99%(GC)人丝氨/苏氨蛋白酶(STK)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框3抗体Piwil2/Mili piwi样2蛋白抗体
盐邻联 AR人丝氨/苏氨蛋白激酶PAK4(PAK4)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框127抗体PIWIL1/Miwi piwi样1蛋白抗体
碱式碳锌 AR,57.5%人丝氨/苏氨蛋白激酶B-raf(BRAF)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框129抗体PITX3 炎症因子3抗体(穿透素)
甘氨 AR,99.5-100.5%人瞬态电压感受器阳离子通道,子类V,成员4(TrpV4)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框130抗体PITX2 成对样同源结构域转录因子2抗体
甘氨钠 98%人瞬态电压感受器阳离子通道,子类V,成员1(TrpV1)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框131抗体PIRH2 泛素连接酶抗体
甘氨酯盐盐 99%人瞬时受体电位阳离子通道,亚科C,成员6(TRPC6)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框135抗体PIRH2 泛素连接酶抗体
甘氨乙酯盐盐 99%人水闸蛋白14(CLDN14)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框141抗体Pinin 桥粒相关蛋白DRS抗体
氟铝 98.5%人水通道蛋白5(AQP-5)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框144抗体Pin1 肽脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体
氟硅 AR,99.0%人水通道蛋白4抗体(AQP-4 Ab)免疫试剂盒COPA蛋白抗体PIM3 丝氨/苏氨蛋白激酶PIM3抗体
氟硅 99.999% metals basis人水通道蛋白3(AQP-3)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框185抗体PIM1 丝氨/苏氨激酶蛋白Pim1抗体
氟化,二水 CP人水痘带状疱疹病IgM(VZV-IgM)免疫试剂盒化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体PILR beta 表面受体PILRβ抗体
氟化,二水 AR人水痘带状疱疹病IgG(VZV-IgG)免疫试剂盒化α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体PILR beta 表面受体PILRβ抗体
支原体检测试剂盒癌易感基因复合蛋白4抗体Human FUT11 ELISA Kit豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒,
纺锤体检查点蛋白抗体Human FUT8 ELISA Kit猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒,
有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体Human FUCA2 ELISA Kit猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒,
癌相关蛋白3抗体Human FUK ELISA Kit马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒,
癌相关蛋白2抗体Human FUT9 ELISA Kit鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒,
癌抗雌耐药蛋白1Human Fukutin ELISA Kit兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒,
胞浆支链氨基酸酸转氨酶抗体Human FUSIP1 ELISA Kit植物赤霉素(GA) ELISA试剂盒,
磷酸化癌抗雌耐药蛋白1抗体Human FUT10 ELISA Kit煌绿黄嘧啶琼脂用于沙门氏的分离培养(Acumedia方法)
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
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