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细胞核提取试剂盒
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详细内容
公司产品仅用于科研细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| 细胞核提取试剂盒 | Nuclear Extraction Kit | 50T|100T |
中文名称:细胞核提取试剂盒
英文名称:Nuclear Extraction Kit
产品规格:50T|100T
发货周期:1~3天
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,性能稳定。
操作步骤:
1. 样本处理
a. 组织匀浆:称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer,再加入50μL Reagent A,0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织,可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800 g 离心5~10 min收集细胞,计数。每次提取需要5 ×107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞,再加入50μL Reagent A,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5mL离心管中,4℃,700g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部,弃上清。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀。
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer,吸取上一步的重悬液,沿管壁小心地加入到此离心管中,置于Medium Buffer之上,4℃,700 g 离心5min。细胞核沉淀在管底。
4. 弃上清,在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉淀,1000g 离心10min ,弃上清,得到较纯的细胞核沉淀。
5. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀,立即使用或⁻⁷0℃保存。
储存条件:4℃
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
柠檬酯 98%人糖原合成酶激酶(GSK)免疫试剂盒组织蛋白酶A抗体PMP2 周围神经髓鞘蛋白2抗体
2-氨-4,6-二嘧啶 98%人糖原合成酶免疫试剂盒CD34抗体PML/TRIM19 早幼粒白血病蛋白抗体
2-氨-4,6-二嘧啶 98%人糖缺失性转铁蛋白(CDT)免疫试剂盒周期素D3抗体PMCA4B 膜钙ATP酶4B抗体
4,6-二-2-巯嘧啶 98%人糖皮质激素受体β(GR-β)免疫试剂盒紧密连接蛋白1抗体(C端)PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase 膜钙ATP酶4抗体
4,6-二嘧啶 98%人糖皮质激素受体α(GR-α)免疫试剂盒转录调节因子C/EBP α 抗体PMCA1 膜钙ATP酶1抗体
N,N′-二-N,N′-(3-)-1,1′-联-4,4′-二(TPD)人糖脂酰肌(GPI)免疫试剂盒核黄素转运蛋白2抗体PMCA 膜钙转运ATP酶抗体
浴铜灵 98%人糖类抗原72-4(CA72-4)免疫试剂盒化钙介质素抗体PMA/Prostate Mucin Antigen 列腺粘蛋白抗原抗体
2-溴芴 97%人糖类抗原50(CA50)免疫试剂盒7号染色体开放阅读框26抗体Plzf 早幼粒白血病锌指蛋白抗体
浴铜灵 purified by sublimation, 99.99% trace metals basis人糖类抗原19-9(CA19-9)免疫试剂盒衰变加速因子CD55抗体PLTP 脂转移蛋白抗体
4,4'-二(9-咔唑)联 98%人糖类抗原125(CA125)免疫试剂盒CD59抗体PLSCR3 脂爬行酶3抗体
2,5-二()- 1-氧-4- (2-乙已氧)- 98%人糖化依赖的黏附分子(GlyCAM-1)免疫试剂盒畸胎瘤衍化生长因子抗体(N端)PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相关蛋白1抗体
2-溴-9-芴酮 96%人糖化血红蛋白A1c(A1c)免疫试剂盒钙激活蛋白酶14抗体PLK5 丝氨/苏氨蛋白激酶5抗体
9,9-二辛-2,7-二溴芴 97%人糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)免疫试剂盒角蛋白18抗体(C端)PLK4/STK18 丝氨/苏氨蛋白激酶18
9,9-二己-2,7-二溴芴 97%人糖化白蛋白(GA)免疫试剂盒7型胶原抗体PLK1 丝氨/苏氨蛋白激酶Plk1抗体
3-癸噻吩 98%人糖蛋白130(gp130)免疫试剂盒化β 连环素蛋白抗体PLGLB2 纤溶酶相关蛋白B2抗体
细胞核提取试剂盒BZW2蛋白抗体Human GAGE1 ELISA Kit小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒,
缓激肽B1受体抗体Human GAK ELISA Kit仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒,
钙激活通道蛋白α1抗体Human GAGE7 ELISA Kit豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒,
卵黄状黄斑病蛋白2抗体Human GABARAPL1 ELISA Kit猪食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒,
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SAD-B抗体Human GABARAPL2 ELISA Kit猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒,
鼻咽癌相关转录调节蛋白抗体Human GALE ELISA Kit猪生长释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,
脑肌酸激酶BCK抗体Human GAN ELISA Kit猪α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒,
β葡萄糖酸苷酶抗体Human GAPDHS ELISA KitP27蛋白(P27)ELISA试剂盒--动物,人
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