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MTT细胞增值与毒性检测试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：MTT细胞增值与毒性检测试剂盒
英文名称：MTT Cell Proliferation ａnd Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：500T
发货周期：1～3天
MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan，在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解，然后通过酶标仪可以测定490nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高;细胞毒性越大，则吸光度越低。
使用说明：
1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，分于96孔板，每孔180μL，3000-10000个细胞/孔。
2.置37℃、5%CO2温箱培养使细胞贴壁，培养6-24小时。
3.加入适当浓度的受试化合物，继续培养适当时间。
4.小心吸去上清，加入90μL新鲜培养液，再加入10μL MTT溶液，继续培养4 h。
5.然后吸掉上清，每孔加入110μL Formazan溶解液，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光值。
6.同时设置调零孔(培养基、MTT、 Formazan溶解液)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、 Formazan溶解液)，每组设定3复孔。
储存条件：-20℃
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
4-氧酮 98%人铁-过氧化物岐化酶(Fe-SOD)免疫试剂盒化半胱氨蛋白酶9抗体POC5 中心粒蛋白抗体
酮 98%人铁调素25(Hepc25)免疫试剂盒化半胱氨蛋白酶9抗体PNPT1 多核苷化酶蛋白抗体
酮 99%人铁调素(Hepc)免疫试剂盒化β 连环素蛋白抗体PNPO 吡哆氧化酶抗体
L-氨乙酯盐盐 98%人铁蛋白重链(FTH)免疫试剂盒化β 连环素蛋白抗体PNPLA6/NTE 含patatin样脂酶6抗体
2-羟喹喔啉 99%人铁蛋白(FE)免疫试剂盒化β 连环素蛋白抗体PNPLA1 含patatin样脂酶1抗体
牛磺脱氧胆 98%人天青杀素/肝素结合蛋白(AZU/HBP)免疫试剂盒化β 连环素蛋白抗体PNMT 乙转移酶抗体
4-叔丁苄 99%人天门冬氨酰-tRNA合成酶(DARS)免疫试剂盒造血干抗原CD133抗体PNK1/PNKP 多聚合苷激酶3化酶抗体
2-氨叔丁酯 97%人天门冬氨氨转移酶(AST)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框138抗体PNAT/NAT2 N-乙酰转移酶2抗体
对叔丁苄硫 97%人糖脂抗体(glycolipid)免疫试剂盒6号染色体开放阅读框50抗体PMVK 羟戊激酶抗体
4＇-叔丁-4-丁酰 98%人糖盏蛋白免疫试剂盒1号染色体开放阅读框151抗体PMS2 肿瘤错配修复因PMS2抗体
L-酪氨乙酯盐盐 98%人糖原化酶同工酶MM(GP-MM)免疫试剂盒肿瘤坏死因子受体超家族成员9抗体PMS1 肿瘤错配修复因PMS1抗体
乙酰 AR,99.0%人糖原化酶同工酶II(GP-II)免疫试剂盒复合列腺特异性抗原单克隆抗体PMS1 肿瘤错配修复因PMS1抗体
5-苄硫四氮唑 98.5%人糖原化酶同工酶BB(GP-BB)免疫试剂盒组织蛋白酶z抗体PMS/FOLH1/PMSA 列腺特异膜抗原抗体
L-肾上腺素 98%（剧品）人糖原化酶(GP)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框84抗体PMPCB 线粒体导肽水解酶β抗体
称量纸 190mm*250mm，500张/包人糖原合成酶激酶3(GSK-3)免疫试剂盒化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗体
MTT细胞增值与毒性检测试剂盒布氏杆体蛋白抗体Human GALK2 ELISA Kit人甲基化酶（Methylase）ELISA试剂盒,
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热门标签：MTT细胞增值与毒性检测,试剂盒
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