公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。中文名称:钙荧光探针(Fluo 3-AM)
英文名称:
产品规格:100ug|1mg
发货周期:1~3天
Fluo-3,AM ester是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3,AM ester进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,大激发波长为506 nm,大发射波长为526 nm。Fluo-3,AM ester的一个重要作用是其在高通量药物筛选中的应用。
别名:钙荧光探针;钙离子探针
CAS号:121714-22-5
分子式:C51H50Cl2N2O23
分子量:1129.85
纯度:≥90%(HPLC)
性状:红色粉末
储存条件:-20℃干燥避光,有效期12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
环己异酯 98%人胃动蛋白2(GKN2)免疫试剂盒化皮层肌动蛋白抗体PRDX5/PRDX6 过氧化还原酶5/6抗体
4--2-吡啶 98%人胃蛋白酶原II 免疫试剂盒化周期素B1抗体PRDX3/peroxiredoxin 3 过氧化还原酶3抗体
4-吡啶-2-酯 98%人胃蛋白酶原I 免疫试剂盒化周期素B1抗体PRDX2/Peroxiredoxin-SO3 硫氧还蛋白过氧化物酶2
5-噻吩-2-磺酰 97%人胃蛋白酶原C(PG-C)免疫试剂盒化cyclin D1抗体PRDX1 过氧化还原酶1抗体
酯 96%人胃蛋白酶原A(PG-A)免疫试剂盒CD13氨肽酶N抗体PRDM2/RIZ1 锌指蛋白RIZ1抗体
5-噻吩-2-磺酰 96%人胃蛋白酶(PG)免疫试剂盒巨噬炎性蛋白MIP-3a抗体PRDM1/Blimp1 B淋巴诱导成熟蛋白1抗体
2--4-氧吡啶 99%人胃癌抗原MG7-Ag 免疫试剂盒间隙连接蛋白32抗体PRCP 脯氨酰羧肽酶抗体
2--5-吡啶 98%人胃癌标志物免疫试剂盒C端结合蛋白1抗体PRC1 胞质分裂调控蛋白1抗体
2,6-吡啶二二酯 98%人尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)免疫试剂盒高分子量角蛋白抗体PRB2/p130 视网膜母瘤相关蛋白p130抗体
3,5-二溴-2-羟吡啶 98%人尾加压素Ⅱ 免疫试剂盒22号染色体开放阅读框39抗体PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1抗体
1,3-二异喹啉 97%人维生素K依赖蛋白Z(PROZ)免疫试剂盒周期素G抗体PRAME 黑色素瘤优先表达抗原抗体
异乙酯 98%人维生素K1(VK1)免疫试剂盒Crk p38抗体PR (progesterone receptor) 孕激素受体抗体
对羟 97%人维生素H(VH)免疫试剂盒化Crk p38抗体PPY/Pancreatic hormone 胰腺激素抗体
4-羟-3-吡啶 97%人维生素E(VE)免疫试剂盒核心结合因子α1抗体(成骨特异性转录因子)Cbfα1PPT1 棕榈酰蛋白硫酯酶1抗体
异喹诺酮 98%人维生素D受体(VD R)免疫试剂盒胆囊收缩素8抗体PPP4C 丝氨/苏氨蛋白酶4C抗体
钙荧光探针(Fluo 3-AM)β晶体蛋白B1抗体Human GBP4 ELISA KitBOC-D-亮氨酸
磷酸化Bax抗体Human GDAP2 ELISA Kit葡聚糖T20
磷酸化癌抗雌耐药蛋白1抗体Human GDE1 ELISA Kit硝酸纤维素薄膜
磷酸化癌抗雌耐药蛋白1抗体Human GDI1 ELISA Kit人抗人类缺陷病抗体(HIV)ELISA试剂盒, HIV ELISA
磷酸化癌抗雌耐药蛋白1抗体Human GBP5 ELISA Kit人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒,Hyl ELISA
磷酸化相关死亡促进因子抗体Human GDI2 ELISA Kit人骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒,ON ELISA
肌动蛋白样蛋白6A抗体Human GBP6 ELISA Kit人组(HIS)ELISA试剂盒,HIS ELISA
磷酸化红阴离子交换蛋白1抗体Human GCAT ELISA Kit人β内酰酶(β-lactamase)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。