产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| Hoechst 33258染色液 | | 1mL |
中文名称:Hoechst 33258染色液
英文名称:
产品规格:1mL
发货周期:1~3天
Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst 33258的大激发波长为346nm,大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,大激发波长为352nm,大发射波长为461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
使用说明:
使用用生理盐水或PBS将Hoechst 33258染色液稀释100倍,即为工作液。
1. 对于固定的细胞或组织:
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆盖住样品即可;对于悬浮细胞,至少加入待染色样品3倍体积的工作液,混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量Hoechst 33258工作液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1mL工作液,对于96孔板一个孔需加入100μL工作液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
公司产品仅用于科研细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
1-辛烷 分析标准品人戊糖素(Pentosidine)免疫试剂盒钙连蛋白抗体PRL1/PTP4A1 肝再生酯酶1抗体
1,3-二烷 98%人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)免疫试剂盒二氢嘧啶酶相关蛋白2抗体PRL 泌素抗体
1,3-二烷 standard for GC, ≥99.5% (GC)人五聚素3(PTX3)免疫试剂盒色素P450ⅡE1抗体Prkg1/cGKI cGMP依赖性蛋白激酶1抗体
1,3-二烷 分析标准品, ≥99.5% (GC)人无花果酶2(FCN2)免疫试剂盒趋化因子受体1抗体PRKD3 蛋白激酶C nu型抗体
2-氨-6-吡啶 97%人乌头酶2(ACO-2)免疫试剂盒化原癌因c-Raf抗体PRKD1/PKC mu 蛋白激酶C mu型抗体
2-氨-4-吡啶 97%人蜗牛同源物2(SNAI2)免疫试剂盒化致癌因C-Myc抗体PRKCQ/PKC theta 蛋白激酶C theta抗体
2-氨-6-氧吡啶 97%人蜗牛同源物1(果蝇)样1蛋白(SNAIL1)免疫试剂盒CD33抗体PRKCDBP 蛋白激酶C delta结合蛋白抗体
2-溴-6-氨吡啶 98%人胃粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤抗体(MALT Lymphoma Ab)免疫试剂盒化原癌因c-kit抗体PRKAR1 蛋白激酶A调节亚a1抗体
5-溴噻吩-2-磺酰 97%人胃内因子(GIF)免疫试剂盒化原癌因c-Jun抗体PRKAG2/AMPKγ2 腺苷单活化蛋白激酶γ2抗体
5-溴噻吩-2-磺酰 97%人胃泌调节素免疫试剂盒离子通道蛋白3抗体PRKAA2/AMPK alpha 2 腺苷单活化蛋白激酶α2抗体
叔丁异酯 97%人胃泌素抗体(GCA)免疫试剂盒化周期素E抗体presenilin 2/PS-2 早老素蛋白-2抗体
3-溴-2-吡啶 98%人胃泌素释放肽体(ProGRP)免疫试剂盒化分裂周期蛋白25C抗体presenilin 1/PS-1 (NT) 早老素蛋白-1抗体
3-异酯 96%人胃泌素释放多肽(GRP)免疫试剂盒化周期素依赖性激酶9抗体presenilin 1/PS-1 (CT) 早老素蛋白-1抗体
邻异酯 98%人胃泌素(Gastrin)免疫试剂盒化Connexin 43蛋白抗体presenilin 1/PS-1 早老素蛋白-1抗体
间异酯 98%人胃动素(MTL)免疫试剂盒丝切蛋白抗体Pregnancy zone protein 区带蛋白PZP抗体
Hoechst 33258染色液骨形态发生蛋白8抗体Human GEMIN6 ELISA Kit大鼠促生长释放(GRH)ELISA试剂盒,
骨形态发生蛋白6抗体Human GEMIN7 ELISA Kit猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒,
磷酸化Bcl-2抗体Human GEMIN4 ELISA Kit兔骨保护素(OPG)ELISA试剂盒,
磷酸化Bcl-2抗体Human GDAP2 ELISA Kit花生凝集素(PNA)ELISA试剂盒,
磷酸化Bcl-xL蛋白抗体Human GDAP1L1 ELISA KitSD-39琼脂
神经母瘤相关蛋白ARID3B抗体Human GDE1 ELISA KitCampy-Cefex 琼脂基础用于弯曲杆分离培养(FDA方法)
微管蛋白β4抗体Human GDAP1L1 ELISA KitL-苯甘氨酸
霍乱肠素β链抗体Human GBP4 ELISA KitD-异亮氨酸