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细胞凋亡检测试剂盒Ⅱ(AP)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
产品摘要：细胞凋亡检测试剂盒Ⅱ(AP)公司正在热销的产品：人肿瘤血管生长因子(TAF)ELISA试剂盒
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详细内容
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中文名称：细胞凋亡检测试剂盒Ⅱ(AP)
英文名称：
中文名称：细胞凋亡检测试剂盒Ⅱ(AP)
英文名称：
产品规格：20T
发货周期：1～3天
保存条件：-20℃冰冻保存。
保存期：一年
工作原理：
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡，其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚，时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活，细胞自身的染色质或DNA 被切割，出现单链或双链缺口，并产生与DNA断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至3’-OH 末端，DIG-dUTP 结合在DNA断点部位，可以通过生物素化抗抗体(Anti-DIG-Biotin)和 SABC-AP反应后，加入显色底物 BCIP/NBT予以显示。凋亡的细胞核呈紫蓝色，从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
试剂盒内容：
1.标记缓冲液(Labeling Buffer)1ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封闭液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗抗体(×100)20μl
6..SABC-AP(×100)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.BCIP/NBT 显色剂(×20)0.2ml
9.抗体稀释液4ml
实验报告：
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
聚氧乙烯 average Mv ~600,000, powder人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框86抗体PXMP1/ABCD3 过氧化物酶膜蛋白1抗体
聚氧乙烯 average Mv ~900,000, powder人雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒钙粘附分子18抗体PVRL1/CD111/Nectin1 脊髓灰质炎受体相关蛋白1抗体
聚氧乙烯 average Mv ~1,000,000, powder人雄烯二免疫试剂盒CD276抗体PUS10/CCDC139 卷曲螺旋结构域蛋白139抗体
聚氧乙烯 average Mv ~2,000,000, powder人雄激素受体(AR)免疫试剂盒21号染色体开放阅读框25抗体Pumilio 1 PUM1蛋白抗体
聚氧乙烯 average Mv ~4,000,000, powder人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)免疫试剂盒22号染色体开放阅读框36抗体PTRH2 Bcl-2转录抑制因子1抗体
聚氧乙烯 average Mv ~5,000,000, powder人胸腺五肽(TP-5)免疫试剂盒补体组分1q子成分样蛋白1抗体PTRF RNA聚合酶1和转录释放因子抗体
聚氧乙烯 average Mv ~7,000,000, powder人胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫试剂盒CD44抗体PTPRA 酪氨酶α抗体
1-乙-(3-二氨)碳二亚盐盐 98.5% 人胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框114抗体PTPN7/HePTP 非受体型蛋白酪氨酶7抗体
1-羟-并-三氮唑(无水) 99%人胸腺嘧啶核苷化酶(TP)免疫试剂盒CD8β链（CD8-β）抗体PTPN6/SHP1 蛋白酪氨酶1C抗体
L-叔亮氨 99%人胸腺质淋巴生成素(TSLP)免疫试剂盒6号染色体开放阅读框1抗体PTPN4/MEG1 蛋白酪氨酶非受体型4抗体
2-羟-4-正辛氧二酮 99%人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)免疫试剂盒γ晶状体蛋白S/γS-crystallin抗体PTPN11 蛋白酪氨酶2抗体
抗氧剂1076 98%人胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)免疫试剂盒9号染色体开放阅读框72抗体PTPIP51/FAM82A2 蛋白酪氨酶相互作用蛋白51抗体
甘露 超纯，≥99.0%(HPLC)人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)免疫试剂盒钙粘附分子10抗体PTPH1/PTPN3 蛋白酪氨酶H1抗体
麦芽糖 95%人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)免疫试剂盒R Cadherin/CDH4PTP1B 蛋白酪氨酶-1B
甘露 植物培养,≥99.0%（GC)人胸苷合成酶(TS)免疫试剂盒大鼠细小病H-1株(H-1)抗体PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酶CD148抗体
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注意事项
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
热门标签：细胞凋亡检测,试剂盒Ⅱ,AP
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