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Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
价格：￥电议
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
产品摘要：Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒公司正在热销的产品：人嗜酸粒趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒
人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒
人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
英文名称：Calcein-AM/PI Double Stain Kit
英文名称：Calcein-AM/PI Double Stain Kit
产品规格：500T
发货周期：1～3天
Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，发绿色荧光（Ex=490nm, Em=515nm）。因其在传统的Calcein（钙黄绿素）基础上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基团，增加了疏水性，使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后，Calcein-AM（本身不发荧光）被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的性分子Calcein，从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM细胞毒性低，是适合用于活细胞染色的荧光探针，而且不会抑制任何的细胞功能，如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶，Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此，Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶（PI）等联合使用，同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿过活细胞的细胞膜，仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光（Ex=535 nm, Em=617 nm），因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发，仅可观察到死细胞。
本试剂盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的双重染料，来进行活细胞和死细胞的双重染色标记，从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据我司优化的实验体系，单次就200μl细胞悬液进行染色。
注意事项
1）由于Calcein-AM对湿度非常敏感，若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。Calcein-AM工作液必须现配现用。
2）碘化丙啶（PI）有一定的致癌性，操作时一定要注意防护。若接触到皮肤，需要立即用自来水清洗。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件：-20℃，有效期12个月
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)人钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)抗体(IgM)免疫试剂盒C型凝集素结构域家族4成员C抗体Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗羊IgM
吉马酮 分析标准品，≥99%人钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)抗体(IgG)免疫试剂盒CD226抗体Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗羊IgM
龙胆苦苷 分析标准品，≥98%人远端上游元件结合蛋白1(FUBP1)免疫试剂盒CD26抗体Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgM
银杏内酯 J 分析标准品，≥99%人原纤维蛋白-1(FBN1)免疫试剂盒免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ/Fc γ RII a抗体Rabbit anti-Goat IgM whole serum 兔抗羊IgM抗血清
银杏(C15:1) 分析标准品，≥99%人原钙黏素1(PCDH1)免疫试剂盒紧密连接蛋白20抗体Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM
银杏(C13:0) 分析标准品，≥98% 人鱼精蛋白1(PRM1)免疫试剂盒中心体蛋白135抗体Rabbit Anti-Goat IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗羊IgG
分析标准品，≥95%人诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫试剂盒半胱蛋白酶蛋白⁻⁷抗体Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗羊IgG
石杉碱乙 分析标准品，≥99%人有丝分裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)免疫试剂盒钙调节素抗体（钙调蛋白/钙调素）Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗羊IgG
盐去氢骆驼蓬碱 分析标准品，≥98%人游离脂肪(FFA)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框181抗体Rabbit Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗羊IgG
异鼠李素 90%人游离原卟啉(FEP)免疫试剂盒Ⅰ型补体受体抗体（C3b/C4b受体抗体）Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗羊IgG
异鼠李素 分析标准品，>98%（HPLC)人游离血红蛋白(f-Hb)免疫试剂盒8型胶原/内皮胶原蛋白抗体Rabbit Anti-Goat IgG/PE PE标记的兔抗羊IgG
异鼠李素 >98%（HPLC)人游离状腺原氨(Free-T3)免疫试剂盒结合转化激活因子CITED1抗体Rabbit Anti-Goat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG
欧胡素 分析标准品，≥98%人游离肉碱免疫试剂盒色素P450 2C9抗体Rabbit Anti-Goat IgG/Gold 胶体金标记的兔抗羊IgG
异阿魏 分析标准品，≥98%人游离列腺特异性抗原(fPSA)免疫试剂盒色素P450 2D6抗体Rabbit Anti-Goat IgG/FITC FITC标记的兔抗羊IgG
异佛手柑内酯 分析标准品，≥98%人游离状腺素(FT4)免疫试剂盒血小板活化因子CTR9抗体Rabbit Anti-Goat IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗羊IgG
Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒磷酸化B-Raf抗体Human GSTM4 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受体1A（BMPR-1A）ELISA试剂盒,
Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒磷酸化B-Raf抗体Human GSTM4 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受体1A（BMPR-1A）ELISA试剂盒,
癌易感基因相互作用蛋白1抗体Human GSTO2 ELISA Kit仓鼠甲状腺结合球蛋白（TBG）ELISA试剂盒,
磷酸化癌易感基因相互作用蛋白1抗体Human GSTM5 ELISA Kit豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物（PAP）ELISA试剂盒,
磷酸化相关死亡促进因子抗体Human GSTZ1 ELISA Kit鸡单纯疱疹病Ⅱ型抗体（HSVⅡ-Ab）ELISA试剂盒,
磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体Human GSTT2B ELISA Kit鸡β内酰酶（β-lactamase）ELISA试剂盒,
磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体Human GSX1 ELISA Kit鸭白介素4（IL-4）ELISA试剂盒,
磷酸化B-Raf抗体Human GRK3 ELISA Kit兔诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）ELISA试剂盒,
磷酸化B-Raf抗体Human GRK5 ELISA Kit兔子血小板活化因子（PAF）ELISA试剂盒,
热门标签：Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染,试剂盒
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