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中文名称:JC-1荧光探针
英文名称:
产品规格:1mg
发货周期:1~3天
JC-1 用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为 1~20 μg/ml,对于很多细胞适宜采用的 JC-1浓度为 10 μg/ml。
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
CAS:3520-43-2
分子式:C25H27Cl4IN4
分子量:652.23
储存条件:-20℃,干燥避光,有效期一年
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
萘 CP山羊血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒NK表面抑制性受体CD94抗体Rabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG
硬脂 分析标准品, ≥99.5%(GC)山羊血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒淋巴功能相关抗原-3抗体Rabbit anti-MG IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗长爪沙鼠IgG
硬脂 40%,熔点54.0-57.0℃山羊血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒皮肤T虏获趋化因子抗体Rabbit anti-MG IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgG
硬脂 98%,熔点69⁻⁷2°C山羊血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫试剂盒补体C3a过敏素抗体Rabbit anti-MG IgG/PE PE标记的兔抗长爪沙鼠IgG
硬脂 Standard for GC,>99%(GC)山羊褪黑素(MT)免疫试剂盒巨噬炎症蛋白-1γ抗体Rabbit anti-MG IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗长爪沙鼠IgG
盐脒,水合 98%山羊铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒神经粘附分子配体1抗体Rabbit anti-MG IgG/Gold 胶体金标记的兔抗长爪沙鼠IgG
溴乙缩二乙 93%山羊瘦素(LEP)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框30a抗体Rabbit anti-MG IgG/FITC FITC标记的兔抗长爪沙鼠IgG
二 97%山羊生长激素释放多肽(GHRP)免疫试剂盒色素P450 11A1抗体Rabbit anti-MG IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgG
3,3-二-1-丁炔 95%山羊生长激素(GH)免疫试剂盒肉碱棕榈酰转移酶1A抗体Rabbit anti-MG IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG
N--1-萘盐盐 97%山羊状腺原氨(T3)免疫试剂盒分化周期CDC42蛋白抗体Rabbit anti-MG IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗长爪沙鼠IgG
乙炔 97%山羊热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)免疫试剂盒化分化周期CDC42蛋白抗体Rabbit anti-MG IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgG
三 97%山羊固酮(ALD)免疫试剂盒环化酶相关蛋白CAP-2抗体Rabbit anti-MG IgG/Bio 生物素标记的兔抗长爪沙鼠IgG
三 97%山羊列腺素内过氧化物合酶1(列腺素G / H合酶和环氧合酶)(PTGS1)免疫试剂盒阶段特异性胚胎表面抗原-1抗体Rabbit anti-MG IgG/APC APC标记的兔抗长爪沙鼠IgG
呫吨-9-羧 98%山羊列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框202抗体Rabbit anti-MG IgG/AP 碱性酶(AP)标记的兔抗长爪沙鼠IgG
2- 99%山羊列腺素E2(PGE2)免疫试剂盒粘膜相关上皮趋化因子28抗体Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗长爪沙鼠IgG
JC-1荧光探针自噬相关蛋白7抗体Human HLA-DQB2(HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 2 chain) ELISA Kit小鼠白介素16(IL-16)ELISA试剂盒,
素受体2抗体Human HLA-F ELISA Kit小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒,
自噬相关蛋白4C抗体Human HIP14/ZDHHC17 ELISA Kit小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒,
自噬蛋白5/凋亡的特异性蛋白抗体Human HIRIP3 ELISA Kit小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒,
芳基硫酸酯酶A抗体Human hIST1 ELISA Kit小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒,
拟南芥ACA11抗体Human HLTF ELISA Kit大鼠糖皮质受体α(GR-α)ELISA试剂盒,
AHA3抗体(拟南芥)Human HLX ELISA Kit大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒,
磷酸化钠ATP酶蛋白a1抗体Human HIST1H1T ELISA Kit大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。