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Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
产品摘要：Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)公司正在热销的产品：人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒
人肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒
人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒
人固酮(ALD)ELISA试剂盒
人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒
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详细内容
中文名称：Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
英文名称：Ki67 cell proliferation Detection Kit
英文名称：Ki67 cell proliferation Detection Kit
产品规格：20T
发货周期：1～3天
Ki67 蛋白是细胞周期相关的一种核蛋白，主要表达于细胞增殖分裂的各个时期（G1、S、G2 和M 期），但是在静息的细胞（G0 期）中不表达。Ki67 常用于检测肿瘤细胞的生长指数（免疫组化法利用计算细胞总数中的Ki67 阳性细胞数所占比例得到Ki67 指数）。
Ki67 通常通过标记抗Ki67 的抗体（FITC 绿色荧光）和DNA 染料碘化丙啶（PI，红色）而利用流式细胞仪检测来实现对细胞周期的检测。
操作方法
1. 在适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞，离心，（注意1）保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀细胞，完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重悬细胞，加入1ul Ki67 抗体(1μg/106 cells)，室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞，用50μl 抗体孵育液重悬，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室温孵育30 分钟。离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后，离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告：
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实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
邻酚 99%小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫试剂盒癌相关蛋白2抗体RNF158 心脏蛋白酶1结合蛋白/环指蛋白158抗体
间酚 99.7%，无色小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) 免疫试剂盒癌抗雌激素耐药蛋白1RNF157 环指蛋白157抗体
间酚 Standard for GC,≥99.7%(GC)小鼠17-酮类固(17-KS)免疫试剂盒胞浆支链氨转氨酶抗体RNF156 环指蛋白156抗体
间酚 CP小鼠17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒化癌抗雌激素耐药蛋白1抗体RNF150 环指蛋白150抗体
间酚 >99.0% (GC)小鼠17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒促凋亡调节蛋白BNIP3抗体RNF15 环指蛋白15抗体
间酚 >98.0%(GC)小鼠17-α睾酮(17-αMT)免疫试剂盒骨形态发生蛋白2受体抗体RNF149 环指蛋白149抗体
间酚 分析标准品小鼠16α羟雌酮1(16-α OHE-1)免疫试剂盒状腺激素受体共激活蛋白抗体RNF148 环指蛋白148抗体
2－－3- 98%小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)免疫试剂盒化促凋亡Bik蛋白抗体RNF144 E3泛素蛋白连接酶144A抗体
2－－3- 分析标准品小鼠12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒蛋白酪氨激酶BAP135抗体RNF14 环指蛋白14抗体
盐苄丝肼 98%小鼠1,4,5-三肌(IP3)免疫试剂盒化相关死亡促进因子抗体RNF14 环指蛋白14抗体
二硝咪唑 97%小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)免疫试剂盒化Bax抗体RNF139 环指蛋白139抗体
4-羟 98%小鼠1,25二羟维生素D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒Bcl-10抗体RNF138 环指蛋白138抗体
硝唑 分析标准品，>99.8%(GC)豚鼠ELISA试剂盒原癌因Bcl-6抗体RNF133 环指蛋白133抗体
硝唑 99%豚鼠组(HIS)免疫试剂盒化Bcl-10抗体RNF130/ 环指蛋白130抗体
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Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)神经分化相关蛋白AHNAK抗体Human KCNE4 ELISA Kit人羟脯氨酸（Hyp）ELISA试剂盒,
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热门标签：Ki67细胞增殖检测,试剂盒,ICF/FACS法
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