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Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:40:57
产品摘要：Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒公司正在热销的产品：人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒
人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒
人粒特异性抗核抗体(GS-ANA)ELISA试剂盒
人封闭抗体(BA)ELISA试剂盒
人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒
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详细内容
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
英文名称：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
英文名称：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
产品规格：50次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种采用Annexin V-FITC与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色， 因此通常将Annexin V与PI配合染色， 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
操作步骤：
1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按 1:3 稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。
储存条件：2～8℃，避光保存
公司产品仅用于科研现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
黄 CP（剧品）小鼠纤连蛋白(FN)免疫试剂盒腺苷活化蛋白激酶γ3抗体TNFR1/TNF Receptor I 肿瘤坏死因子受体1抗体
黄 GR（剧品）小鼠细小病(PV)抗体(IgG)免疫试剂盒腺苷单活化蛋白激酶β2抗体TNFC/lymphotoxin Beta 肿瘤坏死因子C/淋巴素β抗体
过氧乙 AR,18-20%小鼠周期素D3(Cyclin-D3)免疫试剂盒化周期末期促进复合蛋白APC1抗体TNF-alpha(1F6) 肿瘤坏死因子-α单克隆抗体
过氧乙 21-25%小鼠周期素D2(Cyclin-D2)免疫试剂盒周期末期促进复合蛋白APC1抗体TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗体
过氧乙 26-30%小鼠周期素D1(Cyclin-D1)免疫试剂盒化蛋白激酶B2抗体TNFAIP8 肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体
过氧乙 31-35%小鼠因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)免疫试剂盒化铁蛋白Fe65抗体TNFAIP5/Pentraxin 3 肿瘤坏死因子α诱导蛋白5
过氧乙 36-40%小鼠因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)免疫试剂盒化铁蛋白Fe65抗体TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3 肿瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3抗体
过氧乙 41-45%小鼠外信号调节激酶(ERK)免疫试剂盒化APP淀粉样肽体蛋白抗体TNFAIP3 肿瘤坏死因子α诱导蛋白3抗体
过氧乙 46-50%小鼠色素C(Cyt-C)免疫试剂盒化APP淀粉样肽体蛋白抗体TNFAIP2 肿瘤坏死因子诱导蛋白2(TNFα-IP 2)抗体
过氧乙 高纯度，医用，5%（1Gal/PE）小鼠角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫试剂盒化活化复制因子2抗体TNFAIP1 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体
过氧乙 15-17%小鼠角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫试剂盒化活化复制因子2抗体TNF β 肿瘤坏死因子-β抗体
发烟硫 AR小鼠角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫试剂盒化周期末期促进复合蛋白APC1抗体TNF alpha 肿瘤坏死因子-α/TNFα抗体
发烟硫 65%小鼠间粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫试剂盒发育分化增强因子1抗体TNF alpha 肿瘤坏死因子-α/TNFα抗体
结晶四化锡 AR,99.0% 小鼠间粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫试剂盒化发育分化增强因子1抗体TMUB1 跨膜和泛素样结构域蛋白1抗体
结晶四化锡 99.995% metals basis小鼠间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒蛋白激酶B3TMS1/ASC 凋亡相关斑点样蛋白ASC抗体
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒磷酸化APP淀粉样肽体蛋白抗体Human Hsd17b13( 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 13) ELISA Kit基质金属蛋白酶抑制因子2（TIMP-2）ELISA试剂盒－－动物，人
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒磷酸化APP淀粉样肽体蛋白抗体Human Hsd17b13( 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 13) ELISA Kit基质金属蛋白酶抑制因子2（TIMP-2）ELISA试剂盒－－动物，人
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热门标签：Annexin,V-FITC/PI细胞凋亡检测,试剂盒
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