中文名称:活细胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
英文名称:Hoechst 33342 Living Cell Staining Solution
产品规格:0.1ml|0.5ml|3ml
发货周期:1~3天
本品是一种适用于活细胞细胞核染色的溶液。仅需染色10分钟就能用荧光显微镜观察到非常明亮的细胞核蓝色荧光染色。 本产品也适用于固定后的细胞或组织的细胞核染色。
CAS:23491-52-3
分子式:C27H28N6O·3HCl·3H2O
分子量:615.99
激发和发射波长:346nm,460nm
激发和发射波长(和双链DNA结合后):350nm,461nm
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
正常培养的HeLa细胞用本产品染色后的实拍效果图。图A为正常细胞Hoehst 33342的染色效果图。图B中除了正常细胞外,还清晰可见呈现致密浓染的凋亡细胞。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
Celite 硅藻土,洗 用于总膳食纤维含量分析, TDF-100A小鼠血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫试剂盒自噬相关蛋白4D抗体TP53TG3 p53靶蛋白3抗体
助滤剂,洗,碳钠处理,通量煅烧小鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)免疫试剂盒自噬相关蛋白9A抗体TP53I8/EI24 肿瘤蛋白p53诱导蛋白8
助滤剂,通量煅烧(filter aid, flux calcined)小鼠血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)免疫试剂盒缩酶C抗体TP53I13 肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制因)
1-癸烯 95%小鼠血管内皮生长因子D(VEGF-D)免疫试剂盒谷草转氨酶抗体TP53I11 肿瘤蛋白P53诱导蛋白11抗体
二正辛 97%小鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)免疫试剂盒三腺苷结合转运蛋白G超家族成员5抗体TP/thymidine phosphorylase 胸苷化酶抗体
1-己烯 99%小鼠血管内皮生长因子B(VEGF-B)免疫试剂盒三腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体Torc2/Crtc2 CREB转录共激活因子TORC2抗体
1-己烯 分析标准品,≥99.5% (GC)小鼠血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒酰辅酶A脱氢酶长链抗体TORC1/CRTC1 环腺苷应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体
1-己烯 97%小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)免疫试剂盒酰辅酶A脱氢酶中链抗体TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体
1-己烯 Standard for GC小鼠血管紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒酰辅酶A脱氢酶短链抗体TOP2 alpha DNA拓普西异构酶ⅡA抗体
α-乙烯 99%小鼠血管紧张素原(aGT)免疫试剂盒过氧化物酶酰辅酶A氧化酶1抗体TOP1mt 线粒体DNA拓普西异构酶Ⅰ抗体
1-辛烯 98%小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒化凋亡信号调节激酶1抗体Tomoregulin-1 脑肿瘤抑癌蛋白1抗体
2,4,4--1-戊烯 98%小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫试剂盒转化生长因子β诱导蛋白3抗体(半胱氨和丝氨富含核蛋白1)TNR/Tenascin-R 腱糖蛋白R抗体
2,3-二-1,4-萘醌 98%小鼠血管紧张素1⁻⁷(Ang1⁻⁷)免疫试剂盒有丝分裂激酶A/B/C抗体TNNI3K 丝氨/苏氨蛋白激酶TNN13K抗体
2,3-二-1,4-萘醌 分析标准品小鼠血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒蛋白酪氨激酶ATK抗体TNMD/tenomodulin 腱调蛋白抗体(软骨调节素样1蛋白)
对氨 98%小鼠雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒长链脂肪辅酶A连接酶1/2抗体TNK1 非受体型酪氨蛋白激酶Tnk1抗体
活细胞染色液(Hoechst 33342)(100×)ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体Human KRT6B ELISA Kit小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒,
ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体Human Langerin ELISA Kit小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒,
ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体Human KRT80 ELISA KitⅠ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒--动物,人
自噬相关蛋白10抗体Human KRT81 ELISA Kit睾酮受体(TR)ELISA试剂盒--动物,人
酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体Human KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) ELISA Kit雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒--动物,人
氨基酰化酶1抗体Human KPTN ELISA Kit列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒--动物,人
脂肪甘油三酯脂酶抗体Human KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) ELISA KitD-正亮氨酸
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体Human KPNA5 ELISA KitS-羧甲基-L-半胱氨酸