产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 | Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 20次|50次 |
中文名称:Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
英文名称:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
产品规格:20次|50次
发货周期:1~3天
本试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。一个包装的本试剂盒共可以检测20个细胞样品。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC——————100μl
Annexin V-FITC结合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220μl
Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。
Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
本试剂盒还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
本试剂盒的流式检测效果参考图1和图2,荧光显微镜检测效果参考图3。
1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测细胞凋亡的效果图。Jurkat细胞未经处理(A)或用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时(B)后,用本试剂盒染色,然后用流式细胞仪进行细胞的散射和荧光检测。从图中可以看出,经过凋亡诱导剂喜树碱处理后的细胞,其Annexin V-FITC染色阳性并且PI染色阴性的细胞,即凋亡细胞,明显增加(B图的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞,即坏死细胞,也有所增加(B图的右上象限)。图中Annexin V-FITC染色阴性PI染色阳性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B图的左上象限)出现的细胞点是许可范围内的检测误差。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
2.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时后,未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出,未经染色的是双阴性细胞(A),仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞,仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞,Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
储存条件:4℃避光,有效期6个月。
公司产品仅用于科研细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
肉桂 98%猪内皮素1(ET-1)免疫试剂盒脂肪组织分化相关蛋白抗体VIP 血管活性肠肽抗体
酯 99%猪末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫试剂盒脂联素受体1抗体Vinculin 粘着斑蛋白抗体
酰 99%猪缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(AMH)免疫试剂盒肾上腺髓质素受体抗体Vimentin 波形蛋白抗体
酰 99.5%,升华纯化猪免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒脂联素抗体Villin 绒毛蛋白抗体
碳酰肼 97%猪免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒肾上腺髓质素抗体VILIP1 神经视锥蛋白样1抗体(神经钙蛋白)
2,4-二-5-硝嘧啶 97%猪免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒腺苷受体A3抗体VHR/DUSP3 丝氨/苏氨特定蛋白酶抗体
N-乙酰吲哚酮 97%猪免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒ADRA2肾上腺素能受体2抗体VHLH/Von Hippel Lindau 脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体(逢希伯-林道氏病)
1-辛炔-3- 97%猪糜蛋白酶免疫试剂盒肾上腺素能受体β1抗体VHL/HRCA1 脑视网膜血管瘤G7蛋白抗体(逢希伯-林道氏病)
1H-吡唑-4- 98%猪流行性乙型脑炎抗体(IgG)免疫试剂盒肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体VGLUT2 囊泡谷氨转运蛋白2抗体
2-乙酰吡啶 98%猪脂酶A2(PLA2G1B)免疫试剂盒晚期糖化终末产物抗体VGLUT1/BNP1 脑特异性钠依赖无机转运蛋白抗体
3-乙酰吡啶 ≥98%, FG猪激酶,γ1(肌肉)(PHKG1)免疫试剂盒软骨蛋白聚糖抗体VGLL4 转录辅助因子退变样蛋白4抗体
2-乙酰吡咯 99%猪化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)免疫试剂盒5-氨乙酰合酶1抗体VGLL3 转录辅助因子退变样蛋白3抗体
2-乙酰吡咯 ≥98%, FG猪化腺苷活化蛋白激酶(pAMPK)免疫试剂盒p53凋亡激蛋白1抗体VGLL2 转录辅助因子退变样蛋白2抗体
2-乙酰-3-吡 98%猪化外信号调节激酶(pERK)免疫试剂盒P53凋亡激蛋白2抗体VGLL1 转录辅助因子退变样蛋白1抗体
正丁硫 standard for GC, ≥99% (GC)猪甘油酯激酶2(PGK2)免疫试剂盒激活素受体2B抗体VGF/Nerve growth factor inducible 神经生长因子诱导蛋白抗体
Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒抑癌蛋白AIMP3抗体Human MBD4 ELISA Kit水痘带状疱疹病IgM(VZV-IgM)ELISA试剂盒--动物,人
相关蛋白AKAP抗体Human MBD5(Methyl-CpG-binding domain protein 5) ELISA Kit军团抗体IgA(LP Ab-IgA)ELISA试剂盒--动物,人
蛋白激酶A锚定蛋白6抗体Human MBIP ELISA Kit抗呼吸道合胞病抗体(RSV)ELISA试剂盒--动物,人
肺α/β水解酶蛋白1抗体Human MARK4 ELISA Kit脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒--动物,人
水解酶结构域蛋白13抗体Human MARS ELISA Kit睾酮(T)ELISA试剂盒--动物,人
水解酶结构域蛋白14B抗体Human MARVELD2 ELISA Kit大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒,
水解酶结构域蛋白15抗体Human MARVELD3 ELISA Kit小鼠黄体生成素释放(LHRH)ELISA试剂盒,
肺α/β水解酶蛋白3抗体Human MAGEA10 ELISA Kit小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒,