中文名称:细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
英文名称:DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产品规格:50次
英文名称:DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产品规格:50次
发货周期:1~3天
本试剂盒是目先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽提到大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation,是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder,就可以判定细胞发生了凋亡。
样品先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A,可以获得不含RNA的高纯度总DNA,排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多,反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量,样品用量好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测,通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份:
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(一次使用加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (一次使用加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
储存条件:室温,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 产品规格 |
| 细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附) | DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column | 50次 |
公司产品仅用于科研细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
(-)-莽草 分析标准品,≥98%猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒ASTE1蛋白抗体ZNF230/RNF141 锌指蛋白230抗体
水飞蓟宾 98%猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒化自噬相关蛋白4B抗体ZNF23 锌指蛋白23抗体
盐坦索罗辛 98%猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒微丝相关蛋白1抗体ZNF217 锌指脂蛋白217抗体
土贝母苷 分析标准品,>95%猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒腺苷A1A受体抗体ZNF185 锌指蛋白185抗体
高铵 AR猪胰岛素(INS)免疫试剂盒芳硫酯酶B抗体ZNF146 锌指蛋白146抗体
大黄酚 97%猪胰蛋白酶(Trypsin)免疫试剂盒γ氨丁转氨酶抗体ZHX2/Alpha ferotein regulator 1 胎蛋白调节蛋白1抗体
大黄素 ≥90% (HPLC)猪一氧化氮(NO)免疫试剂盒共济失调蛋白2结合蛋白1抗体Zfp91 白血病相关新因抗体
大黄 分析标准品,≥98%猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)免疫试剂盒肿瘤坏死因子α转换酶ZFAND5 AN1型锌指蛋白5抗体
大黄 98%猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒芳香烃受体核转录蛋白2抗体ZEB1/AREB6 负调控因子白介素2抗体
达旦黄 CP猪血小板衍生生长因子(PDGF)免疫试剂盒AlkB同源蛋白8抗体ZDHHC21 γ-氨丁A受体相关膜蛋白3
烯缩水甘油酯 98%猪血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒ABI因家族成员3结合蛋白抗体ZDHHC17/HIP14 NFκB激活蛋白205抗体
亚硫氢 AR猪血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒Rho GTP酶激活蛋白20抗体ZDHHC16 凋亡调控蛋白ZDHHC16抗体
乙 99%猪血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体ZCWCC1 ZCWCC1抗体
乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)猪血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒乙脱氢酶1蛋白家族L1抗体ZBTB2 锌指蛋白437抗体
冰乙 AR,99.5%猪血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒轴抑制蛋白2抗体ZAP⁻⁷0 zeta相关蛋白70抗体
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)磷酸化凋亡信号调节激酶1抗体Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA KitC肽(C-Peptide)ELISA试剂盒--动物,人
磷酸化活化复制因子2抗体Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit小鼠过敏素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒,
磷酸化钠ATP酶蛋白a1抗体Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒,
磷酸化钠ATP酶蛋白a1抗体Human CRTC2(CREB-regulated transcription coactivator 2) ELISA Kit水痘带状疱疹病IgG(VZV-IgG)ELISA试剂盒--动物,人
乙酰辅酶A羧化酶抗体Human total SOD(superoxide dismutase) ELISA Kit反应性生长(irGH)ELISA试剂盒--动物,人
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒--动物,人
磷酸化Ack1抗体Human TLR8(Toll-like receptor 8) ELISA Kit小鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒,
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体Human peptidoglycan(peptidoglycan) ELISA Kit小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒,
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.