产品特点
适用仪器:全自动核酸提取仪;
标本类型:鼻咽拭子、灌洗液、血清、血浆、细胞培养液、组织匀浆液上清等;
提取时间短:提取过程只需13min;
提取效率高:灵敏度可达100拷贝/ml;
抗污染性强:试剂盒基于超顺磁性的磁性粒子纯化技术,可大程度减少交叉污染的风险;
安全环保:提取过程中无需使用有毒的酚抽提。
中文名称:人核糖核酸酶P检测试剂盒(荧光PCR法)(ROX)说明书
产品规格:50T
产品货号:GOY-01P64107
运输:低温运输
保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
性能指标
1、准确度
对阳性核酸参考品的测定结果应为阳性,对阴性核酸参考品的测定应为阴性。
2、精密度
批内精密度应符合Ct值的变异系数(CV,%)≦5%
3、干扰物质
当样品中甘油三酯浓度≦300mg/dL,胆红素浓度≦10mg/dL,血红蛋白浓度≦200mg/dL,总蛋白≦10g/dL,IgG≦1g/dL浓度时,测试结果的干扰偏差应在±10%范围内。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
技术特点:
1准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
戴尔根霉抗志贺素O139抗体(仔猪水肿病志贺素O139)Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒
泰国放线短链孢菌表皮生长因子抗体Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛脂酰辅酶A脱氢酶免疫试剂盒
根瘤菌表皮生长因子抗体Human MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛脂酰辅酶A合成酶免疫试剂盒
弗兰克氏菌磷酸化真核翻译延长因子2抗体Human DUPD1 (Dual specificity phosphatase DUPD1) ELISA KIT牛脂联素(ADP)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种真核延伸因子激酶2抗体Human ENDOD1 (Endonuclease domain-containing 1 protein) ELISA KIT牛脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒
赖氨酸芽胞杆菌属磷酸化真核延伸因子激酶2抗体Human DNM1L (Dynamin-1-like protein) ELISA KIT牛脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒
中华灵芝(紫芝)真核启动因子2α抗体(eIFα2)Human DNAAF1 (Dynein assembly factor 1, axonemal) ELISA KIT牛载脂蛋白B100(Apo-B100)免疫试剂盒
瓶形毛壳磷酸化一氧化氮合成酶3(内皮型)抗体Human ERAP1(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 1) ELISA Kit牛孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒
海洋杆菌真核翻译延长因子2抗体Human EBP (3-beta-hydroxysteroid-Delta(8),Delta(7)-isomerase) ELISA KIT牛诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫试剂盒
短小芽孢杆菌癌基因ERG3抗体Human DUOX1(Dual oxidase 1) ELISA Kit牛游离纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)免疫试剂盒
特尼里弗诺卡氏菌猪源产肠素性K88-K99抗体Human ENAM (Enamelin) ELISA KIT牛印度猬因子(IHH)免疫试剂盒
太平洋白单胞菌FAS凋亡抑制分子3抗体Human DSTYK (Dual serine/threonine and tyrosine protein kinase) ELISA KIT牛乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌纤维束1抗体Human DUSP3 (Dual specificity protein phosphatase 3)ELISA KIT牛乙酰辅酶A(acetyl-CoA)免疫试剂盒
交链孢属叉头蛋白P3抗体Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛胰高血糖素样肽1(GLP-1)免疫试剂盒
瓦克青霉免疫球蛋白G Fc段受体IHuman MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP⁻⁷)免疫试剂盒
酿酒酵母叉头蛋白M1抗体Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)羊藿素
温哥华假单胞菌Pseudomonas│vancouverensis 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)异戊二烯
土曲霉Aspergillus│terreus Thom 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)异皮啶
人核糖核酸酶P检测试剂盒(荧光PCR法)(ROX)说明书牛胆盐:1.5
氯化钠:5.0
中性红:0.03
结晶紫:0.001
蛋白胨:17.0
多价蛋白胨:3.0
琼脂:13.5
PH:7.1±0.2
用法:称取本品50克,溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌20分钟,冷至45-50℃加入无菌亚碲酸钾0.5mg,噻孢霉素0.01mg(或加入一支山梨醇麦康凯琼脂添加剂),混匀,倾入无菌平皿备用
性状:干燥粉末。易潮解。
用途:生化研究。用于O157:H7的选择性分离培养
保存:RT