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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

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马鼻肺炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 9:58:34

产品摘要:马鼻肺炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书的热销产品:22号染色体开放阅读框43抗体Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) 磷酸化氨酸蛋白酶C底物Marcks抗体
C2CD3蛋白抗体Anti-Phospho-MARCKS (Se

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试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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旗舰版网址:http://www.elisaguyan.com

详细内容

操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
马鼻肺炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
GOY-01P63683
50次
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
蒿(标准品)英文名称: 3,4-Dimethoxycinnamic acid磷酸化离子通道蛋白Kv3.1抗体包装1g
蒿乙英文名称: Cefodizime sodium周期基因1蛋白抗体包装25g
诃子(标准品)英文名称: Cefdinir驱动蛋白KIF5B抗体包装5g
诃子林鞣酸(标准品)英文名称: Boc-D-Glutamine kelch样蛋白13抗体包装1g
诃子鞣质,诃子鞣酸英文名称: Gibberllin A4+7钙激活通道蛋白3抗体包装5g
合欢花(标准品)英文名称: CH5424802 肾脏和脑蛋白抗体包装25g
合欢皮(标准品)英文名称: p-Methoxycinnamic acid 有丝分裂驱动蛋白样2B抗体包装5g
何乌(标准品)英文名称: Serotonin hydrochloride(5-HT)kelch样蛋白9抗体包装25g
和厚朴酚(标准品)英文名称: Ingenol 驱动蛋白家族成员15抗体包装5g
荷叶(标准品)英文名称: β-Amyrin 着丝点关联蛋白1抗体包装1g
荷叶碱(标准品)英文名称: Cefsulodine sodiumkelch样蛋白5抗体包装5g
鹤庆五味子癸素英文名称: o-Phthalaldehyde驱动蛋白家族成员C1抗体包装25g
鹤庆五味子辛素英文名称: Melengestrol acetateKelch样蛋白22抗体包装5g
鹤虱(标准品)英文名称: Cholesterol esterase 电压门控通道Kv4.1抗体包装1g
黑豆(标准品)英文名称: SP600125酸敏感离子通道蛋白3抗体包装5g
嗜热铁质菌Ferroplasma│thermophilium 质量规格:>99%,USP32,BR抗胃壁抗体试剂盒L-谷氨酸;L-Glutamic aci
毛霉Mucor│sp. 质量规格:含量测定抗尾状核试剂盒格列风内酯;Griffonilide
刺孢小克银汉霉原变种Cunninghamella│echinulata var. echinulata 质量规格:>98%,USP34,BR,可用于培养抗网硬蛋白抗体试剂盒广防风苷A;Epimeredinosid
马鼻肺炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书酸性红92;荧光桃红;四溴四氯荧光素;焰红B;石南红;玫瑰红;焰红染料B;标记红;2’,4’,5’,7’-四溴-4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)占吨]-3-酮;红色28
Phloxine B
其他 Tetrachlorotetrabromofluororescein sodium salt;Phloxine;Acid red 92;Eosin 10B;Tetrabromotetrachlorofluorescein disodium salt;3,4,5,6-Tetrachloro-2′,4′,5′,7′-tetrabromofluorescein sodium salt;C.I. 45410
产品规格: 高纯,90%
包装:5克/25克/100克
CAS号:18472-87-2
别:High purity grade
含量:≥90.0%
λmax:536~540nm(0.02 mol/L 醋酸铵溶液)
干燥失量:≤10.0%
性状:砖红色或棕红色至暗棕色粉末。溶于水为蓝红色溶液带微深绿色荧光,溶于乙醇为蓝红色溶液带砖红色荧光,在盐酸中加温时生成棕黄色沉淀,在氢氧化钠中生成蓝色沉淀,在浓硫酸中呈黄色溶液,加热时不发生变化,稀释时产生黄红色沉淀。
用途:生化研究。生物染色。吸附指示剂。荧光指示剂。检定汞。用于Mallory's 荧光桃红-亚甲基蓝染色;Kreyberg's 方法用于角质素和粘液
保存:RT

热门标签:马鼻肺炎病毒,探针法荧光定量,PCR试剂盒

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