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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

第10年

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猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒说明书

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 9:58:34

产品摘要:猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒说明书的热销产品:锌指蛋白851抗体Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78抗体(热休克蛋白70蛋白5)
嗜乳脂蛋白2亚型A1抗体Anti-GRP94/gp96 葡萄糖调节蛋白94抗体
磷酸化c-fos抗

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产品完善度: 访问次数:1081

试剂盒

ATCC细胞

标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

荧光PCR试剂盒

细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

抗体

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详细内容


服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒说明书
GOY-01P63543
50次
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
红景天(标准品)英文名称: n-Amyl mercaptan岩藻糖变旋酶抗体包装5g
红景天苷(标准品)英文名称: AmberliteIR-120X三体综合征相关蛋白FUNDC1抗体包装100g
红景天素;草质素甙;英文名称: Amyl acetate弗林蛋白酶抗体包装25g
红芪(标准品)英文名称: Acehe富含丝氨酸/精氨酸重复结构蛋白抗体包装500g
红曲(特殊发酵)(标准品)英文名称: Azobenzene岩藻糖基转移酶6抗体包装1g
荭草苷(标准品)英文名称: Asbestos acid washed岩藻糖基转移酶7抗体包装5g
厚朴(厚朴)(标准品)英文名称: Acenaphthene眼睛和头发颜色相关蛋白FUZ抗体包装10g
厚朴酚(标准品)英文名称: Aluminum solution滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体包装1g
厚朴总酚(对照品)英文名称: Aluminum solution磷酸化碱性成纤维生长因子受体1抗体包装5g
胡薄荷酮;长叶薄荷酮英文名称: (±)-Catechin hydrateFAM65B蛋白抗体包装25g
胡黄连(标准品)英文名称: Elaidic acid胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体包装5g
胡黄连苷 II(标准品)英文名称: Heptadecanoic acid凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体包装25g
胡黄连苷 III(标准品)英文名称: Heptadecanoic acid纤维母生长因子受体底物3抗体包装5g
胡黄连苷IV英文名称: Leucomalachite Green纤维连接蛋白抗体包装1g
胡黄连苷I(标准品)英文名称: Methyl ArachidateFCHO1蛋白抗体包装25g
苏云金芽孢杆菌日本亚种Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al. 质量规格:HPLC>98%,标准品溶血血小板活化因子试剂盒齐墩果酸;Oleanic acid
动性微菌Planomicrobium│sp. 质量规格:HPLC>98%,USP溶酶体相关膜蛋白2试剂盒芹菜素;Apigenin
白灵菇Pleurotus│nebrodensis 质量规格:>98%,USP溶菌酶试剂盒蒲公英甾醋酸酯;Taraxastery
猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒说明书橡胶促进剂D;促进剂DPG;1,3-二苯胍;对称二苯胍;N,N-二苯胍;二聚丙二醇;N,N’-二苯基胍
DPG
其他 Diphenyl guanidine;1,3-Diphenylguanidine;N,N'-Diphenylguanidine;sym-Diphenylguanidine;Melaniline
产品规格: AR,99%
包装:100克
CAS号:102-06⁻⁷
别:AR
含量:≥99.0%
熔点:148~151℃(2℃)
乙醇溶解试验:合格
干燥失重:≤0.3%
硫酸盐:≤0.03%
氯化物:≤0.003%
铁:≤0.001%
重金属:≤0.002%
灼烧残渣:≤0.01%
性状:结晶。微有气味。味苦。加热至170℃时分解。易溶于稀无机酸,溶于乙醇、、热苯和热甲苯,微溶于水。水溶液呈强碱性。相对密度 1.13。熔点 150℃。有毒,半数致死量(小鼠,经口)290mg/kg。有刺激性。
用途:生化研究。标定酸的基准物。橡胶硫化促进剂。石油分离萃取剂
保存:RT

热门标签:猪流行性腹泻病毒染料法,荧光定量RT-PCR试剂盒

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