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公司新闻
APCR ELISA操作核心禁忌具体有哪些
点击次数：271发布时间：2026/2/25 15:57:58
样本采集与处理禁忌
禁用含热原/内毒素试管：血清采集必须使用无热原、无内毒素试管，否则激活凝血因子，干扰APCR检测结果。
禁暴力混匀或延迟离心：采血后须3000 rpm离心10分钟（血清）或15分钟（血浆），延迟或离心不足会导致溶血、纤维蛋白残留，升高本底信号。
禁反复冻融或室温久置：血清/血浆若需保存，应分装后于–20℃或–70℃冻存；反复冻融会破坏蛋白C活性，影响APCR比值准确性。
实验操作关键禁忌
禁省略封闭步骤：包被后未及时封闭（如用BSA或Tween），将造成严重非特异性结合，导致高背景和孔间CV值升高。
禁交叉使用封板膜：封板膜必须“一板一换”，重复使用极易引发孔间交叉污染，尤其在S0（阴性对照）与高浓度标准品之间。
禁加样时触碰孔壁或产生气泡：加样务必加至孔底，避免挂壁、溅出或气泡——气泡会阻碍酶标抗体结合，造成显色不均甚至假阴性。
禁擅自更改温育参数：必须严格按说明书执行温育温度（常为37℃或2–8℃过夜）、时间及震荡条件（如500±50 rpm）；偏差10分钟即可显著影响APC结合效率。
试剂与环境禁忌
禁使用过期/变质显色剂：TMB显色液若呈浅蓝色或配制后放置超30分钟，氧化失效，导致显色弱或OD值偏低。
禁在高温/低温环境操作：实验环境温度须稳定在18–25℃；低于15℃易致包被抗体吸附不均，高于28℃则加速非特异反应。
禁忽略试剂平衡：ELISA试剂盒取出后，须室温平衡30–60分钟再使用，否则冷凝水混入反应体系将稀释关键组分。
