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小鼠12羟二十烷四烯酸酶联免疫试剂盒操作步骤

点击次数:382发布时间:2023/12/18 15:05:19

  小鼠12羟二十烷四烯酸酶联免疫试剂盒操作步骤:

 
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
 
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50%l。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40%l,然后再加待测样品 10%l。加样将样品加 于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
 
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
 
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
 
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 后弃去,如此重复 5 次,拍干。
 
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50%l,空白孔除外。
 
7. 温育:操作同 3。
 
8. 洗涤:操作同 5。
 
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50%l,再加入显色剂 B50%l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50%l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
 
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

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