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当前位置:阿仪网 > 上海谷研实业有限公司>公司新闻>火鸡出血性肠炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提

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火鸡出血性肠炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提

点击次数:528发布时间:2023/3/15 13:45:51

 火鸡出血性肠炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒样品RNA的抽提

 
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
 
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
 
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
 
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
 
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
 
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
 钩藤皂苷I英文名称:Effect of ginsenoside ICAS号:21-2001分子式:分子量:
 小白菊内酯英文名称:White ChrysanthemumCAS号:20554-84-1分子式:248.32分子量:C15H20O3
 肉苁蓉苷A英文名称:Boschnaloside ACAS号:14-1001分子式:分子量:
 除虫菊素I英文名称:The ICAS号:121-21-1分子式:328.45分子量:C21H28O3
 四氢巴马汀英文名称:Four MartinCAS号:6024-83-5分子式:分子量:
 脱水长春碱英文名称:Dehydrated Changchun baseCAS号:38390-45-3分子式:792.96分子量:C46H56N4O8
 (±)-吴茱萸碱英文名称:(+) - evodiamineCAS号:518-18-3分子式:303.37分子量:C19H17N3O
 高铼酸铵英文名称:Ammonium perrhenateCAS号:13598-65-7分子式:268.24分子量:H4NO4Re
 甲基橙皮甙英文名称:MethylhesperidinCAS号:11013-97-1分子式:624.59分子量:C29H36O15
 人参皂苷CK英文名称:Ginsenoside CKCAS号:分子式:分子量:
 阿替洛尔英文名称:AtenololCAS号:29122-68-7分子式:266.34分子量:C14H22N2O3
 磷酸奥司他韦英文名称:OseltamivirCAS号:204255-11-8分子式:410.4分子量:C16H31N2O8P
 依非韦伦英文名称:According to the non Wei LunCAS号:154598-52-4分子式:315.67分子量:C14H9ClF3NO2
 黄芪多糖英文名称:Astragalus polysaccharideCAS号:89250-26-0分子式:254.69分子量:C10H7ClN2O2S
 橙皮素英文名称:HESPERITINCAS号:520-33-2分子式:302.29分子量:C16H14O6
 大豆异黄酮英文名称:Soybean isoflavoneCAS号:分子式:分子量:
 

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