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公司新闻
猕猴胚胎来源细胞复苏操作要点
点击次数：804发布时间：2021/6/21 16:06:37
猕猴胚胎来源细胞复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过Z易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人肝细胞；HL-7702[L-02]
人肝细胞；QSG-7701 [QSG7701]
人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]
人张氏肝细胞；Chang liver
人羊膜细胞；WISH
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞；CCD-1095Sk
人正常乳腺细胞；Hs 578Bst
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92 [NK92]
人B淋巴母细胞；HMy2.CIR
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞；NK-92MI [NK92MI]
人脐静脉内皮细胞；HUV-EC-C
人正常乳腺上皮细胞；MCF 10A
人胚肾细胞；2V6.11
人正常肺上皮细胞；BEAS-2B
人肺成纤维细胞；HFL1
人胚肺成纤维细胞；IMR-90
人胚胎，皮肤，肌肉；M-7
人胚胎，皮肤，肌肉；M-20
人胚胎，皮肤，肌肉；M-22
人正常列腺上皮细胞；RWPE-1
人羊膜细胞；WISH
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人胚胎肺成纤维细胞；WI-38
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
人淋巴细胞；1301
人胚肺二倍体细胞；KMB-17
