1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人脑微血管内皮细胞Human brain microvascular endothelial cells
人脑血管平滑肌细胞Human brain vascular smooth muscle cells
人海马神经元Hippocampal neurons
人少突胶质细胞Oligodendrocytes
人星形胶质细胞Astrocytes
小鼠成纤维细胞(EGFP标记)Mouse fibroblasts (EGFP mark)
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞MCF, mouse cardiac fibroblasts
MN-c, 小鼠皮质神经元MN-c, mouse cortical neurons
MN-h, 小鼠海马神经元MN-h, in hippocampal neurons of mice
MSC, 小鼠雪旺细胞MSC, mouse Schwann cells
MA, 小鼠星形胶质细胞MA, mouse astrocytes
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞MLF, mouse Lymphatic Fibroblasts
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞MRTEC, mouse renal tubular epithelial cells
CSC, 小鼠心肌细胞CSC, mouse myocardial cells
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓MEPC, murine bone marrow endothelial progenitor cells
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞MEF, mouse embryonic fibroblast cells
NSC,大鼠神经干细胞NSC, rat neural stem cells
RN-h, 大鼠海马趾神经元RN-h, rat hippocampal neurons
rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓REPC, rat endothelial progenitor cells of bone marrow
RN-c, 大鼠皮质神经元RN-c, in rat cortical neurons
RN-s, 大鼠纹状体神经元RN-s neurons of rat striatum
RSC, 大鼠雪旺细胞RSC, rat Schwann cells
RA, 大鼠星形胶质细胞RA, rat astrocytes