般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特别改造的热启动 Taq DNAPolymerase、MgCl2、优化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等。PCR 反应时,只需将适当的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反应。
ROX Reference Dye:般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 扩增仪上,用于调整 PCR 加样误差所引起的 PCR 管与管之的差异。不同
仪器所需ROX Reference Dye 浓度不同,用户可以根据仪器的推荐浓度添加。DNase-Free ddH2O:超纯水,用于 PCR 反应。
2、 如果样品可以用Trigol法提总RNA ,也可以将样品研磨后放在 Trigol中,动植物组织 : 50~100mg/mlTrigol,贴壁细胞:10cm2/mlTrigol,悬浮细胞:5×106动植物,酵母细胞或细菌细胞10×107/mlTrigol。
4、 实时荧光定量PCR服务您定要提供样品及要扩增基因的详细信息。
胎盘绒毛膜细胞37905-08-1胸腺活化调节趋化因子检测试剂盒
子宫平滑肌细胞37921-38-3胸腺非依赖性抗原检测试剂盒胰酪胨大豆羊血琼脂基础Hoechst 33258 solution 猴三碘状腺原氨酸(T3)ELISA Kit
酪蛋白琼脂Hoechst 33342 猴绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA Kit
胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)Hoechst 33342 猴蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA Kit
产芽孢肉汤Hoechst 33342 solution 猴皮质醇(COR)ELISA Kit
亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础Hoechst 33342 solution 猴尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit
腺病毒B型探针法荧光定量PCR试剂盒多粘菌素B(1.2mg)BAPTA, AM 猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit
多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基BAPTA, tetrapotassium salt 猴可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit
疱肉培养基基础BAPTA, tetrasodium salt 猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA Kit
疱肉牛肉粒Fluo-3, AM 猴精氨酸酶1(ARG1)ELISA Kit
液体硫醇酸盐培养基Fluo-3, AM 猴状腺素(T4)ELISA Kit
卵黄琼脂培养基基础Fluo-3, AM 猴环磷酸腺苷(cAMP)ELISA Kit
葡萄糖肉浸液肉汤Fluo-3, AM *5mM solution in anhydrous DMSO* 猴环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA Kit
匹克氏肉汤基础AFluo-3, pentasodium salt 猴骨形态发生蛋白受体2型(BMPR2)ELISA Kit