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对损伤细胞保护的检测指标

点击次数:1234发布时间:2018/9/19 9:51:34

 1. 细胞存活力

      张骏等人在绿原酸对心肌缺血 - 再灌注损伤的防护1)的研究中设置了3个组,分别是对照组,缺氧复氧组和绿原酸干预组,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)方法检测心肌细胞的存活率,结果显示和缺氧复氧组相比,绿原酸干预组心肌细胞活性明显升高,表明绿原酸对细胞有促生长作用。
 
  2. 乳酸脱氢酶(LDH)
      LDH是存在于细胞质中的一种酶,当细胞膜受到损伤时,LDH会释放到培养基中。检测培养基中LDH的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。
      孟富慧等人在研究硫化氢供体对皮肤细胞的保护2)中,设计了H2O2诱导皮肤细胞损伤模型,用四硫代钼酸铵(ATTM)作为新型硫化氢供体,结果显示与H2S供体GYY4137类似,ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2S,在H2O2处理前给予ATTM预处理,细胞死亡率降低,有明显的细胞保护作用。表明四硫代钼酸铵可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。

3. 细胞凋亡

      活性氧(ROS)可引起细胞凋亡,在细胞凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V可以与磷脂酰丝氨酸特异结合。用绿色荧光FITC标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。

      王莹莹等人在研究人参皂苷Rg1保护冈田酸诱导的PC12细胞损伤3)中,用Annexin V-FITC/PI试剂盒结合流式细胞仪检测细胞凋亡,结果显示冈田酸诱导PC12细胞凋亡,而人参皂苷Rg1可以减少冈田酸诱导PC12细胞早期凋亡的细胞数量,表明人参皂苷Rg1具有保护冈田酸诱导的PC12细胞损伤的作用。

4. 线粒体膜电位

      线粒体膜电位改变与细胞氧化损伤和凋亡发生密切相关,氧化损伤造成膜电位下降,诱导细胞凋亡。

      孟富慧等人在研究硫化氢供体对皮肤细胞的保护2)中,设计了H2O2诱导皮肤细胞损伤模型,用四硫代钼酸铵(ATTM)作为新型硫化氢供体,用荧光染料Rh123检测线粒体膜电位,结果显示用H2O2处理可降低细胞的ΔΨm,而在细胞遭受损伤前给予200 μmol/l ATTM预处理可明显提高ΔΨm。表明四硫代钼酸铵可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。

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