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公司新闻
抗原修复的方法
点击次数：1149发布时间：2018/4/27 10:00:22
免疫组化中，组织在福尔马林或者其他固定液的固定过程中，经常会出现蛋白质交联而引起的抗原决定簇封闭，极大的降低抗原的检出率和假阴性现象。此外，临床病理诊断中，免疫组化的应用广泛，因此抗原修复成为了免疫组化极其重要的一环。不同的抗原，采取不同的适宜的抗原修复方法，才能获得的清晰、有效的结果。一般情况下，抗原修复的方法主要有三大类：高温高压修复法、微波加热修复法、酶消化法。那我们又该以何种方法来选择呢？
提示：
抗原修复的强度排序：高温高压修复法（准确度高，条件稳定适合大规模处理，易脱片）> 微波加热修复法（反应强度适中，微波加热不均匀不适宜大规模处理）> 酶消化法；
抗原修复方法应用广度：微波加热修复法（实验室常用）>高温高压修复法（医院常用）> 酶消化法（针对一些特殊组织和靶点效果独特，应用不太广泛）;
修复液的效果对比：EDTA（pH=8.0 或 9.0）缓冲液 > 柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）
细胞质抗原修复
绝大多数细胞质抗原不做任何修复，一般也能获得相对稳定的染色结果。但采取一些抗原修复方法，可以是抗原决定簇释放的更加充分，进一步提高结果的可靠性和敏感性。所以我们一般采取的是强度适中，反应相对温和的抗原修复方法。推荐使用微波修复法（加热的时间和温度都可以有所调整，可以根据经验或者查阅文献获得）
推荐的方法：微波加热修复法
推荐的修复液：常用柠檬酸盐缓冲液（pH=6.0）
实验过程：微波高温加热 2 min（见微小波动，温度在 90～95 ℃）后，立即转为保温 8 min 待缓慢降至室温，用蒸馏水冲洗 2 次，加入 3% H2O2 8 ~10 min，在用蒸馏水冲洗 2 次，放入 PBS 中并进入下一步骤。（提示：在实际的修复试验中，我们还要控制好修复时间，时间过长容易导致过修复、组织破坏和非特异性反应增强等不利影响）
鉴别汉黄芩素对照品111514-20040320mg
鉴别甜菊苷对照品111515-20000120mg
鉴别棉酚对照品111517-20000120mg
含量测定木犀草素对照品111520-20050420mg
含量测定金丝桃苷对照品111521-20030320mg
含量测定升麻素苷对照品111522-20040620mg
含量测定5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品111523-20040520mg
含量测定木香烃内酯对照品111524-20050320mg
鉴别去氢木香内酯对照品111525-20040420mg
