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生化检测试剂盒

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分子试剂

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公司新闻

细菌生理生化鉴定

点击次数:2771发布时间:2018/2/7 10:19:22

将分离菌株接种于营养琼脂平板上,28 ℃培养24 h后观察细菌菌落的颜色、大小和形态,同时进行革兰氏染色镜检细菌的个体形态。将菌株无菌操作接种于细菌微量生化鉴定管中进行理化特性鉴定,具体方法参照《常见细菌系统鉴定手册》。

 细菌16S rRNA基因序列分析: 按照细菌DNA提取试剂盒说明书提取分离菌株的DNA。细菌16S rRNA基因扩增通用引物由上海迈浦生物科技有限公司合成,正向引物27F:5′-AGAGTTTGA TC(C/A)TGGCTCAG-3′;反向引物1492R:5′-GG TTACCTTGTTACGACTT-3′。基因序列的扩增体系和条件参照梁利国等的方法进行。PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,随后将PCR产物送上海迈浦生物科技有限公司进行纯化和序列测定。

 系统发育树的构建: 将得到的16S rRNA基因序列通过NCBI进行BLAST,根据比对结果检索出同源性较高的序列采用ClustalX软件进行多序列比对,再用MEGA 5.0软件包中的Neighbour-Joining法构建系统进化树,采用Kimura 2-parameter作为校正模型,通过1 000次Bootstrap检验置信度。

药物敏感试验: 采用琼脂扩散法(K-B)对菌株进行30种常用抗生素的敏感性检测。将分离菌株接种于营养肉汤,28 ℃、200 r/min培养18 h后,稀释菌液浓度至1.0×107 CFU/mL,取200 μL均匀涂布于MH琼脂平板上,贴上不同的药敏纸片,置于28 ℃培养箱中培养24 h后测量抑菌圈直径(包括药敏纸片),以抑菌圈直径大小作为判定细菌对药物敏感性的标准。

50mg 455-14-1 来氟米特相关物质A标准品
50mg 91224-69-0 雷尼替丁相关物质A标准品
50mg 72126-78-4 雷尼替丁相关物质B标准品
50mg 73851-70-4 雷尼替丁相关物质C标准品
50mg 利托那韦相关物质混合物标准品
50mg 55-56-1 氯己定相关物质标准品
50mg 95-85-2 氯唑沙宗相关物质A标准品
50mg 221264-21-7 罗匹尼罗相关物质B标准品
50mg 57432-61-8 马来酸甲麦角新碱标准品
50mg 美司那相关物质A标准品
50mg 美司那相关物质B标准品
50mg 56718-76-4 美托洛尔相关物质B标准品
 

菌

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