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技术文章
抗人Nigo单抗杂交瘤细胞；IF4G7-NOGO培养操作规程
点击次数：3151 发布时间：2022/5/26 15:13:05
抗人Nigo单抗杂交瘤细胞；IF4G7-NOGO培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；YOU质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
H9c2大鼠心肌细胞（ATCC来源）
C2C12, 小鼠肌原细胞
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系
大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）
HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系
CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞
SF9, 昆虫卵巢细胞
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞
HET-1A, 人食管上皮细胞
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞
GC-1, 鼠精原细胞
293A，人胚肾上皮细胞系（腺病毒包装别）
hDPSCs, 人磨牙牙髓干细胞
293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系
EPC, 大鼠血管内皮祖细胞
HBE, 正常人支气管上皮细胞系
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞
HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系
HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞
HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞
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