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技术文章
脂肪酸合成酶(FAS)生化试剂盒操作
点击次数:1404 发布时间:2025/12/24 14:10:09
一、操作步骤
样本处理
细胞样本:按500–1000:1的比例(如500万细胞加1mL提取液)冰浴超声破碎(300W,超声3秒/间隔9秒,共5分钟),4℃ 12000g离心20分钟,取上清待测。
组织样本:按1:5–10比例(如0.1g组织加1mL提取液)冰浴匀浆,4℃ 12000g离心20分钟,取上清待测。
液体样本:如血清/血浆,可直接测定。
测定步骤
预热紫外分光光度计/酶标仪至340nm,蒸馏水调零。
试剂三37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)预热15分钟。
按顺序添加底物和样品,启动反应,每隔一段时间记录吸光度值,计算FAS活性。
二、注意事项
试剂保存:提取液4℃保存,试剂一、二、四-20℃保存,试剂三4℃保存。
操作安全:避免接触有毒有害物质,控制实验条件稳定性。
样本要求:建议做2–3个预期差异大的样本预实验,若吸光值不在测量范围内需稀释或增加样本量。
三、应用领域
主要用于科研,如研究脂肪酸代谢相关疾病、药物研发及生物学机制。
在肿瘤研究中,FAS活性与肿瘤细胞生长和增殖密切相关,可通过测定其活性评估肿瘤恶性程度和治疗效果。
四、自备仪器
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅/培养箱、低温离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器/超声波细胞破碎仪、冰和蒸馏水。
原创作者:上海谷研实业有限公司






