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技术文章

木贼镰孢(斜面)分子生物试剂菌种的培养

点击次数:3000 发布时间:2024/4/9 16:48:32

木贼镰孢(斜面)分子生物试剂菌种的培养:

⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备 
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备 
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备 
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一种子、二种子和三种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一种子,把一种子转入发酵罐内发酵,称为二发酵。如果将一种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二种子,将二种子转入发酵罐内发酵,称为三发酵。同样道理,使用三种子的发酵,称为四发酵。

原创作者:上海谷研实业有限公司

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