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技术文章
人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒洗涤方法
点击次数：3227 发布时间：2021/11/16 14:35:06
人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒洗涤方法：
1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60。洗板5次。
2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为bao证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。
7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
人正常来源细胞
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
人包皮成纤维细胞；HFF
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人皮肤成纤维细胞；CCC-HSF-1
人羊膜细胞；WISH
人胚肺成纤维细胞；CCC-HPF-1
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1
人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF
人胚胎眼Tenon＇s囊成纤维细胞；HFTF
人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2
人肾小管上皮细胞；HKC
人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2
人胚胎气管组织来源细胞；CCC-HBE-2
人胚肾二倍体细胞；CCC-HEK-1
人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1
人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2
人胚胎肠粘膜组织来源细胞；CCC-HIE-2
人胚胎胰腺组织来源细胞；CCC-HPE-2
人胚胎肌肉组织来源细胞；CCC-HSM-2
人葡萄膜黑色素细胞；UM
人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]
SV40T转化的人胚肾细胞（亚系）；293T/17
293来源病毒包装细胞；ΦA
293来源病毒包装细胞；ΦA-GP
人永生化表皮细胞；HaCaT
SV-40转化肺成纤维细胞；WI38/VA13
人乳腺上皮细胞；MCF-10A
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人胚肺二倍体细胞；2BS
人胚肺二倍体细胞；KMB-17
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
原创作者：上海谷研实业有限公司
