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上海谷研实业有限公司 主营产品:lisa试剂盒/菌种/ATCC细胞/生化试剂/标准品

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当前位置:阿仪网>上海谷研实业有限公司>技术文章>对虾传染性皮下及造血组织坏死症病毒核酸检测试剂盒操作流程

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标准品

RNA/DNA提取

生化试剂

菌种

培养基

elisa试剂盒

PCR检测试剂盒

生化检测试剂盒

原代细胞

质粒

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细胞生物学试剂

分子试剂

细胞系

细胞培养基

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技术文章

对虾传染性皮下及造血组织坏死症病毒核酸检测试剂盒操作流程

点击次数:3662 发布时间:2020/4/2 16:06:38

对虾传染性皮下及造血组织坏死症病毒(IHHNV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)流程:

1. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
2. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
3. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
4. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
5. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
6. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。

7. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。

8. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。

9. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。

原创作者:上海谷研实业有限公司

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