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技术文章
疫组化、Western、ELISA，是免疫学三大常用工具
点击次数：4042 发布时间：2019/5/22 15:46:25
疫组化、Western、ELISA，是免疫学三大常用工具，分别用于定位，定性和定量。那么，我们今天就来说说这三者之间的差别以及其具体使用的场景。
1、IHC
中文名称：免疫组化
英文名称：Immunohistochemistry
简介：是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。
2、ELISA
中文名称：酶联免疫吸附试验
英文名称：Enzyme linked immunosorbent assay
简介：用到了免疫学原理和化学反应显色，待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液，因而没有用到组织包埋、切片等技术，这是与免疫组化的主要区别，操作上 开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面，从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上，这就是“吸附”的含义。
3、WB
中文名称：蛋白质印迹
英文名称：Western Blot
简介：先要进行SDS-PAGE，然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上，而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品，可以用于定性和半定量。
对于IHC来说，定位是免疫组化的优势：
该方法可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定位较直接准确、定性灵敏度高，是定位检测分析方法对病理学领域开展深入研究是十分有意义，尤其对于有些因子的转位研究十分有用。
WB与IHC技术相比，定量可能更加准确：
当然WB也可定性和定位(通过提取膜蛋白或核蛋白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量，进而间接反映它们的定位)，但敏感性远远低于IHC。
ELISA与免疫组化技术相比，定量*准确，是分泌性蛋白检测方法
尤其对于微定量分析多个样本非常有用，所用试剂和样品量很少，结果精确。IHC针对性比较强，而且一般是以组织或者细胞为样本，而ELISA一般是使用血清或者组织磨碎液。免疫组化可以快速检测样本中抗体的阳性或者阴性，一般不用于定量检测。
原创作者：上海谷研实业有限公司
