血清是细胞培养中zui重要的元素之一。因此,特别整理了一些实验室里常会遇到的问题,供大家参考:
1、保存血清zui好的方法是什么?
建议血清应保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。反复冻融会对血清的品质造成不良影响。
2、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
3、何谓热灭活?
一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
4、有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热灭活的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
因此建议您,若非必须,您可以不做热灭活处理血清。这样,不仅节省您宝贵的时间,更确保血清的质量。只在做免疫学研究或培养干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,才推荐做热灭活。也有已经热灭活的血清可供选择。
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