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技术文章
悬浮细胞传代的操作步骤
点击次数：8480 发布时间：2018/1/25 10:03:59
方法一：
1.当细胞适合传代（即：处于对数生长期而未达到汇合状态）时，从培养箱中取出培养瓶，使用无菌吸管从培养瓶中取出少量细胞样品；如果吸取样品前细胞已经沉淀，应转动培养瓶，使细胞在培养基中均匀分布；
2通过此样品，采用血球计数器或细胞计数仪测定总细胞数；计算将细胞稀释到推荐接种密度时需要加入的培养基体积；
3.在无菌状态下将适量预热的生长培养基加入到培养瓶中；必要时可将培养的细胞分到多个培养瓶中；
4.将培养瓶的瓶盖拧松一圈，以便进行充分的气体交换（或者使用透气性瓶盖），并将培养瓶恒温培养箱中静置培养（注：为了尽量减少细胞碎片和无用的代谢副产物在培养体系中蓄积，每周应将细胞悬液至少离心一次，离心力为200×g，时间为3-5分钟，然后用新鲜的生长培养基重新悬浮细胞沉淀）。
方法二：
1.将细胞悬液转移到15mL无菌离心管中，以200×g离心力离心3-5分钟（请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
2.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中；
将培养瓶的瓶盖拧松一圈，以便进行充分的气体交换（或者使用透气性瓶盖），并将培养瓶恒温培养箱中静置培养。|
CC趋化因子受体4IgG 猪单核增多性李斯特菌素O((LLO)
CC趋化因子受体7IgG 猪促胃液素受体(GsaR)
CD105/转化生长因子β受体IgG 猪促生长激素释放激素(GHRH)
CD10IgG 猪促卵泡素(FSH)
CD117IgG 猪促甲状腺素释放激素(TRH)
CD122/白介素2受体β链IgG 猪雌二醇受体(ER)
CD134IgG 猪雌二醇(E2)
CD137IgG 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)
CD148IgG 猪超氧化物歧化酶(SOD)
CD14蛋白IgG 猪肠三叶因子(ITF)
CD150IgG 猪层连蛋白/板层素(LN)
CD151IgG 猪补体蛋白3(C3)
CD155IgG 猪表皮生长因子(EGF)
CD163IgG 猪白血病抑制因子受体(LIFR)
CD167aIgG 猪白介素8(IL-8/CXCL8)
CD169IgG 猪白介素6(IL-6)
CD177IgG 猪白介素-5(IL-5)
CD17IgG 猪白介素4(IL-4)
CD19IgG 猪白介素3(IL-3)
CD203cIgG 猪白介素2(IL-2)
CD205IgG 猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)
原创作者：上海谷研实业有限公司
