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技术文章
人晶状体上皮细胞培养方法
点击次数：3159 发布时间：2022/9/28 13:47:47
人晶状体上皮细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入wan全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入wan全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
L-丙氨酸L-Alanine56-41-7
β-丙氨酸β-Alanine107-95-9
DL-薄荷醇DL-Menthol89-78-1
薄荷醇Menthol2216-51-5
补骨脂定Psoralidin18642-23-4
补骨脂二氢黄酮Bavachin19879-32-4
补骨脂二氢黄酮甲醚Bavachinin19879-30-2
补骨脂酚Bakuchiol10309-37-2
补骨脂宁Corylin53947-92-5
补骨脂素Psoralen66-97-7
苍术素Atractylodin55290-63-6
草乌甲素Bulleyaconitine A107668-79-1
草质素Herbacetin527-95-7
草质素苷Rhodionin85571-15-9
梣酮Fraxinellone28808-62-0
茶黄素Theaflavin1011850
茶黄素-3＇-没食子酸酯Theaflavin-3＇-gallate28543-07-9
茶黄素-3-没食子酸酯Theaflavin-3-gallate 30462-34-1
茶碱Theophylline58-55-9
柴胡皂苷ASaikosaponin A20736-09-8
柴胡皂苷BSaikosaponin B
柴胡皂苷B1Saikosaponin B158558-08-0
柴胡皂苷B2Saikosaponin B258316-41-9
柴胡皂苷CSaikosaponin C20736-08-7
柴胡皂苷DSaikosaponian D20874-52-6
蟾毒灵Bufalin68403-26-8
长春质碱Catharanthine2468-21-5
常春藤皂苷元Hederagenin465-99-6
朝藿定AEpimedin A110623-72-8
朝藿定A1Epimedin A1
原创作者：上海谷研实业有限公司
